梅植物基因组分子生物学鉴定及分类研究-遗传育种与生物技术专业毕业论文.docxVIP

格谊物基园组分子生曲学筌宽反分妻研究致 格谊物基园组分子生曲学筌宽反分妻研究 致 谢 本论文是在导师林伯年教授的精心指导下完成的，导师严谨的治学态 度、渊博的知识和高瞻远瞩的学术眼光使我受益匪浅，终生难忘。在论文的 选题、实验的顺利完成到论文写作和修改过程中，导师都倾注了大量的心血， 并在生活上给予了极大的关心和帮助。三年来，不仅学到了丰富的专业知识， 提高了理论水平，也掌握了许多的实验手段和方法，拓宽了视野，也学到了 导师严谨的治学态度和活跃的思维方式，在此对导师的谆谆教导表示最衷心 的感谢! 在论文的完成过程中，感谢徐昌杰老师在实验过程中给予悉心的指导、 安新民博士等老师和同学的无私帮助。特别是浙江林学院森林培育重点学科 的杨萍老师、林新春老师等的热情支持和帮助，以及浙江林学院98级的吴 建红、邵清松、史东辉等的帮助，在此表示衷心的感谢! 最后，特别感谢我的妻子、父母及所有亲人在三年中给予我的巨大精神 鼓励和支持，使得论文得以顺利完成。 程晓建 2002年5月 杭州·华家池 1Il植物基因组分子t物学鲞定反分娄研究摘要 1Il植物基因组分子t物学鲞定反分娄研究 摘要 本研究对54个供试材料(其中包含27个花梅品种、1 9个果梅品种、8个李杏品种) 形态部分的叶片、果核的性状特征进行分析，然后采用RAPD分子标记技术对其基因组DNA 差异进行检测及聚类分析。结果表明： ————‘。‘。’。’一 ＼ 李、杏、梅三者在叶片的形态特征上有较大差异。李类植物的叶形为长椭圆形，叶 基楔形，叶面无毛，叶柄绿色且无毛；杏类植物叶面粗糙、有毛；梅类植物接近于杏类， 与杏类植物有较近的亲缘关系，但又表现出丰富的种质特异性。从三者的果核特征来看， 李类植物核表面较平滑，具皱纹；梅类植物核表面核点较多，表面粗糙；杏类植物核表 面平滑，易于区分，但对于各类品种之间，却很难进行比较和分类。 选用改良CTAB法提取的梅及其近缘种的基因组DNA可直接用于PCR扩增分析，且效 果良好。 从1 32个引物中筛选得到2 0个引物，共扩增出2 64个片段，扩增最多的引物是$44、 $446和s4 5 6(1 7个片段)，最少的是引物s4 52(9个片段)，平均每个引物产生1 3．2个 RAPD片段，片段长度多数集中在4 00—2 5 00bp之间。 不同引物扩增出的带型完全不同，聚类分析结果表明，李属植物和杏属植物能完全 被区分开，李、杏和梅之间表现出一定的亲缘关系，其中杏、梅之间的亲缘关系较近， 各属品种之间都有不同的遗传距离，最小距离为0．11 38，最大距离为0．7633，遗传距离 的大小反映了材料间亲缘关系的远近，各属内品种的亲缘关系比较近，这一聚类结果从 供试材料基因组DblA分子水平验证了传统的形态学分类观点。 从对供试材料进行的RAPD结果分析来看，梅类的果梅、花梅之间及各品种之间难以 、 进行鉴别，而红叶李与其它李类及梅类、杏类各大类有较大区别，似可另列一类。孓 本研究验证了梅及其近缘种的形态学分类结果，但对于属以下的分类并不能完全提 供佐证。从分析结果进一步证明RAPD技术可作为植物属间分类鉴定的依据。在选择引物 得当，实验条件稳定的前提下，结果的重复性较好，也能够进行特定品种之间的鉴定。 丈章还对RAPD技术对梅及其近缘种进行分类鉴定的可行性、在系统学研究中的问题 及红叶李、桃形李的分类地位及进行了讨论。 关键词：梅y鉴定；RAPD技术i分类 橹埴物基园组分子生物学鲞定反分卖研究l 橹埴物基园组分子生物学鲞定反分卖研究 l 前言 梅(Prunus mume)系我国主产之传统名花佳果。中国栽培最早，《诗经·召南》-tl 记载“檩有梅，其实七兮 ”， 意思是落下来的梅子，在树上的果实还有十分之七 ， 其后《山海经》、《尔雅》等古籍中，均有关于梅的记载 。梅在中国已有3000年以【：的 应用(果实)历史，以收获果梅为主要目的的引种栽培始于2500年前，而主要目的在于 观赏的花梅栽培，至少可追溯到2000年前之汉初。梅在中国主要分布在长江流域、西南、 华南和台湾等地，长江以北分布较少，世界上除中国以外，仅限于日本和南朝鲜；欧美 栽培甚少，且仅供观赏I“。 最近30多年来，海内外学者在梅的各个研究领域取得了较丰硕的成果。其【=|-X,J-梅的 分类研究是广泛且深入，为今后的进一步研究奠定了孥实的基础，也为我国花卉品种的 系统登录起了先导作用，了解和掌握前人在梅的分类上所作的研究成果，以期对今后梅 的分类研究有所裨益。 1．1梅植物分类系统的建立和发展 梅原产我国，有关梅的记载最早追溯到《诗经》，作为观赏花木，最早见于《西京杂 记》。至宋代，第一部梅花专著——范成大《梅谱》，载有梅花品种1 1个f3l。此外，《群芳 谱》、《花镜》等著作中也有梅的