罗格列酮与长春新碱合用对人口腔表皮样癌细胞的抗肿瘤作用研究-药学专业毕业论文.docxVIP

9．Westem 9．Westem blotting实验 ．．23 10．抗血管生成作用检测 23 10．1．HUVECs划痕实验 23 10．2．HUVECs小管形成实验 24 l 1．统计学数据分析 24 实验结果 25 1．ROSI增强VCR对KB及KB厂v细胞的细胞毒作用 ．．25 1．1．KBⅣ细胞耐药性的检测 25 1．2．RoSI增强VCR对KB及KB／v细胞的生长抑制作用 ．．25 1．3．RoSI增强VCR对KB及KBⅣ细胞的克隆形成抑制作用 28 1．4．RosI与VCR合用协同抑制KBⅣ细胞内的P13列Akt信号通路 ．29 2．ROSI对VCR细胞毒性的协同作用不依赖于PPARY通路 30 3．ROSI与VCR合用对KB厂V细胞内耐药蛋白P-gp的表达和功能的影响 32 3．1．ROSI与VCR合用对KB厂v细胞膜上P—gp外排功能的影响 ．32 3．2．ROSI与VCR合用对P—gp蛋白表达的影响 ．33 4．ROSI增强VCR抑制微管蛋白聚合的作用 ．33 5．ROSI与VCR合用对KB及KB，v细胞周期分布的影响 ．．34 5．1．ROSI与VCR合用后可诱导l①厂V细胞发生G2／M期阻滞 34 5．2．ROSI与VCR合用对细胞周期相关蛋白的调节 ．．35 6．ROSI与VCR合用诱导KB及KB／v细胞凋亡的作用 一36 6．1．Hoechst 33342染色法观察细胞核形态学变化 ．36 6．2．AmlexinV．FITc／PI双染法定量检测细胞凋亡率 37 6．3．ROSI与VCR合用对细胞凋亡相关蛋白的调节 ．．39 7．ROSI与VCR合用抑制HUVECs血管生成 40 7．1．ROSI与VCR合用抑制HUVECs迁移 ．．40 7．2．ROSI与VcR合用抑制HUVECs管状结构形成 ．41 8．ROSI与VCR合用对人正常细胞株的细胞毒作用 ．4l 讨论 ．．43 结论 。47 万方数据 参考文献 参考文献 ．48 致{射 。58 攻读硕士学位期间发表论文 ．59 万方数据 ContentsAbstract Contents Abstract in Chinese 1 Abstract in Engnsh 3 Abbreviations 5 Introduction 7 1．Oral cancer and the current tre釉ent ． ．7 2．Multidrug resistaJlce(MDR)in oral cancer 8 2．1．ABC transportors and MDR in oral cancer ．8 2．2．Cell cycle a11d MDR in oral cancer ．9 2．3．Ap叩tosis and MDR in oral cancer 1 0 2．4．P13K／Akt pathway and MDR in oral cancer 10 3．Rosiglitazone and its cullrent anti-ancer study ．．1l Meterials 13 1．CoⅡ1pounds ．1 3 2．Celllines 一1 3 3．Reagents 1 3 4．S01ution preparation 1 5 5．Instnunents ． ．．．． ．．． ．．． ． ．．．．．．． ． ．． ． ．．．1 8 Methods 。19 1．CeU culture． ．． ． ． ．．． ．．．19 2．C”otoxic assay ．1 9 2．1．MTT assay 1 9 2．2．CCK．8 assay ．20 3．Clone fonnation assay ．20 4．Rhodaminel23 accumulation assay 21 5．Hoechst 33342 staining 21 6．A1111exin V_FlTC／PI staining assay 21 7．I珈LInunonuorescence staining 22 8．Cell cycle analysis 22 万方数据 9．Westem 9．Westem blotting analysis ．．23 10．Anti—angiogenesis analysis 23 10．】．Wbund scratch assay ofHUVECs ．．23 10．2．Capillary tube fornlation assay ofHUVECs ．24 11．Statistical analysis ．．24 Results ．25 1．ROSI eIlhances t11e c”otoxicity ofVCR in KB an