东北农业大学动物医学学院药物分析I（各论）课件 第五章.pptVIP

VitA、D2、D3、 E、K1 等 VitAD胶丸中VitA的含量测定 精密称取本品(规格10000VitAIU/丸)装量差异项下（平均装量0.07985g/丸）的内容物 0.1287g 至10ml烧杯中，加环己烷溶解并定量转移至50ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀；精密量取2.0ml，置另一50 ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀。以环己烷为空白，测定最大吸收波长为328nm，并在下列波长处测得吸收度为 A300 ：0.374 A316 ：0.592 A328 ：0.663 A340 ：0.553 A360 ：0.228 （等吸收比法） （二） 2. 游离生育酚 氨基嘧啶环－CH2－噻唑环(季铵碱) 三、杂质检查 1.溶液的澄清度与颜色：有色杂质 分光光度法2.铁、铜离子：原子吸收分光光度法 1、易溶于水 2、水溶液呈酸性 结构与性质 一、 （一） 溶解性 二烯醇结构 二酮基结构 二烯醇结构 （二） 还原性 有活性 有活性 无活性 △ 糖类的显色反应 50℃ 结构与糖类相似 （三） 具糖的性质 C3－OH的 pKa = 4.17 C2－OH的 pKa = 11.57 酸性 （四） 一元酸 L(+)－抗坏血酸 活性最强 手性C（C4、C5） （五） 光学活性 * * 与碱反应 （六） 水解性 与氧化剂的反应 （一） 鉴别试验 二、 去氢抗坏血酸 緘 緘 畗 緘 ] O [ VitC 1、与AgNO3反应 2、与2，6 - 二氯靛酚反应 (ChP2000) 氧化型 玫瑰红色 还原型 蓝色 OHˉ (ChP2000) （玫瑰色） （无色） 3.其他氧化剂的反应： 亚甲蓝或高锰酸钾 试剂褪色碱性酒石酸铜 砖红色沉淀磷钼酸 钼蓝 糖类的反应 （二） 或盐酸 50℃ 吡咯 USP 緘 ] O [ 生育红 （一） 硝酸反应 橙红色 鉴别 二、 75℃15′ 緘 緘 緘 畗 緘 HNO 3 VitE 生育酚 （橙红色） 生育红 生育酚 HNO3 强氧化剂 三氯化铁－联吡啶反应 （二） 生育酚 对-生育醌 [O] 弱氧化剂 血红色 = 41.0～45.5 λmax = 284nm λmin = 254nm 0.01%无水乙醇中 UV法 （三） 薄层板 硅胶G 展开剂 环己烷 -乙醚（4 ：1） 显色剂 硫酸（105℃ 5′） VitE Rf = 0.7 ?-生育酚 Rf = 0.5 ?-生育醌 Rf = 0.9 TLC法 （四） 杂质检查 三、 原理 酸度 以NaOH滴定液（0.1mol/L）体积控制。 （M生育酚= 430.8） 例 取本品0.10g，加无水乙醇5ml溶解后，加二苯胺试液1滴，用硫酸铈液（0.01mol/L）滴定，消耗硫酸铈液（0.01mol/L）不得过 1.0ml。 ≤2.15％ 限量 四、 含量测定 GC法（法定方法） （一） GC特点 1、 选择性好 灵敏度高 速度快 分离效能好 挥发性低、不稳定、极性强→衍生化易受样品蒸气压限制 载气→N2 固定液→硅酮（OV-17） 担体→硅藻土或高分子多孔小球 柱温→265℃ 检测器→氢火焰离子化检测器(FID) 内标→正三十二烷 n ≥ 500 R≥2 VitE测定的色谱条件 2、 内标法加校正因子 内标法 供试液（样品+内标） 内标物 对照液（对照+内标） 是样品中不存在的物质 与被测组分峰靠近 能与各组分完全分离 与被测组分的量接近 校正因子： W W K K % VitE % 100 1 2 = 稀释倍数 稀释倍数 样 对 实际工作中的计算方法 × × × × （二）HPLC法 外标法 此外，还有铈量法、比色法和荧光法 返 回 第四节 维生素B1 HCl Cl- （一） 溶解性 1、易溶于水 2、水溶液呈酸性 （二） UV 共轭双键 λmax = 246nm 结构与性质 一、 与生物碱↓→↓ （三） 硫色素反应 （四） 嘧啶环 —— 噻唑环 —— （五）盐酸根 呈氯化物的反应，用于鉴别。 ChP 鉴别试验 二、 （一） 硫色素反应 硫色素 ＋2H VitB1 H+ H+ H+ H+ （二） 沉淀反应 S元素反应 Cl-反应 （三） 其他反应 ( ) 瘆 緘 緘 緘 緘 緘 2 1 PbS NaS Vi