慢性砷暴露对小鼠肾脏的DNA损伤及牛磺酸和维生素C的保护作用-劳动卫生与环境卫生学专业毕业论文.docxVIP

独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地 方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含 为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。 与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明 确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名： 室j起 签字日期： 堕年旦月旦El 学位论文版权使用授权书本学位论文作者及指导教师完全了解大连医科大学有关保留、使 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者及指导教师完全了解大连医科大学有关保留、使 用学位论文的规定，同意大连医科大学保留并向国家有关部门或机构 送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权 大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库 进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论 文。 论文作者签名： 室立墼 指导教师签名： 整兰逢 签字Et期： 世年旦月兰日 慢性砷暴露对小鼠肾脏的DNA损伤及牛磺酸和 慢性砷暴露对小鼠肾脏的DNA损伤及牛磺酸和 维生素C的保护作用 硕士生姓名：刘 爽 指导教师：朴丰源 教授 专业名称：劳动卫生与环境卫生学 摘 要 前言：砷是一种在世界上广泛分布的环境污染物，它以无机砷和有 机砷两种形式存在。砷中毒的流行区主要分布于亚洲各地以及中南美国 家，全世界数千万人口饮用受砷污染的水。砷暴露可导致人和动物多器 官的毒性损伤乃至癌症。肾脏是砷毒性的主要靶器官。砷可以在肾脏中 累积及代谢，引起急性肾损伤；慢性砷暴露可导致肾癌。氧化损伤被认 为是砷引起机体功能障碍的机制之一，但确切的机制还不清楚。活性氧 族可引起DNA的氧化损伤生成8．OH．dG，因此8．OH．dG可作为DNA氧 化损伤特异而敏感的标记物。到目前为止，国内有关慢性砷暴露所致肾 损伤还未见报道。 方法：健康昆明种小鼠60只，雌雄各半，体重20±29。按体重将 小鼠随机分为6组：lppm As203染毒组；2ppm As203染毒组；4 ppm的 As203染毒组；牛磺酸保护组(4 ppm As203+l 50 mg／kg牛磺酸)和维生 素C保护组(4 ppm As203+45 mg／kg维生素C)；蒸馏水对照组。小鼠正 常饮食，室温l 8～22℃，通过自然饮用含不同浓度As203蒸馏水的方式 使小鼠暴露于砷。保护剂是以灌胃方式投给，每星期2次。连续染毒60 天，颈椎脱臼法处死小鼠后立即取肾组织用福尔马林固定，用HE染色 法进行组织病理学观察。按照链霉卵白素．过氧化物酶连结法进行免疫组 化染色，并应用图像分析软件对8．OH．dG表达的总光密度值进行定量分析。 采用SPSS 11．5统计软件，计量资料用X4-$表示，用单因素方差分析 (ANOVA)比较各染砷组与对照组间的统计学差异，以P0．05表示统计学 差异显著。 结果：与对照组相比，各染砷组小鼠肾组织出现不同程度细胞肿胀， 胞浆空泡变性，核固缩、溶解及血管扩张、充血等病理学改变，近曲小 管较肾小球损伤严重。免疫组化结果表明染砷组8．OH．dG的表达显著增 高(低剂量组总光密度值：926．33±298．01；中剂量组总光密度值：’ 1654．2±571．02；高剂量组总光密度值：5522．7±686．34)，并呈明显的剂 1654．2±571．02；高剂量组总光密度值：5522．7±686．34)，并呈明显的剂 量反应关系，各染砷组总光密度值与对照组(4．94l 2±1．6743)相比，有 显著性差异(尸0．01)。而且，8．OH．dG在近曲小管的表达高于肾小球区 域。牛磺酸和维生素C保护组小鼠肾组织上述病理学变化较轻，8．OH．dG 的表达也少(牛磺酸保护组总光密度值：25．833±5．901 6；维生素C保护 组总光密度值：23．320±1 2．121)，其总光密度值显著低于各染砷组(尸 O．01)。 结论：慢性砷暴露可引起小鼠肾脏组织病理变化，近曲小管是砷对 肾脏损害的主要靶部位。肾脏的病理损伤与8．OH．dG的表达相一致。外 源性抗氧化剂牛磺酸和维生素C，对砷诱导的肾脏组织损伤具有一定的 预防和保护作用，并通过降低DNA的氧化损伤来实现，这些也证明了氧 化损伤是砷的毒性机理之一。 关键词：三氧化二砷 肾脏 8．羟基脱氧鸟嘌呤 牛磺酸 维生素C 2 Protective Protective effects of taurine and vitamin C on mouse kidney DNA damages exposed to As chronically Master’S Ca