黄酮对人前列腺癌细胞DNA氧化损伤修复的生理机制-生物化学与分子生物学专业毕业论文.docx

中山大学博士学位论文：黄酮对人前列腺癌细胞DNA氧化损伤修复的生理机制黄酮对人前列腺癌细胞D从氧化损伤修复的生理机制 中山大学博士学位论文：黄酮对人前列腺癌细胞DNA氧化损伤修复的生理机制 黄酮对人前列腺癌细胞D从氧化损伤修复的生理机制 摘要 前列腺癌是一种常见的男性恶性病，其死亡率在男性癌症中仅次于肺癌。前 列腺癌的发牛与很多因素有关，据统计非裔美国男性患前列腺癌的几率在全世界是 最高的，而食用很多植物性食品、豆类、绿茶的亚洲男性患前列腺癌的几率最低。 研究表明蔬菜、水果、豆类、绿茶等食物来源的黄酮类物质对前列腺癌的发生有很 好的预防和抑制能力。能够抑制癌细胞生长和恶化的物质对预防前列腺癌具有很重 要的意义。而研究这些物质的抗癌机制是发现和开发新药物、保健品的重要基础。 目前已经有很多关于黄酮预防癌症的报导，但是对其生物利用度，抗癌、防癌机制 等方面的研究则较为少见。内源和外源性的活性氧自由基具有很强的氧化活性，能 够对细胞内的脂类、蛋白质、DNA等生物大分了造成损伤。癌症的氧化自由基学 说认为，一牛中某些关键牛物大分子损伤的积累晟终会导致慢性病和癌症。基于以 上问题，本研究认为黄酮类物质可以促进受损伤DNA的修复，从而预防和减缓前 列腺癌的发牛和发展。探讨了一种荷尔蒙依赖性的前列腺癌细胞LNCaP受到氧化 损伤后，黄酮对其DNA氧化损伤修复的促进作用及机制：1．通过细胞培养技术及 HPLC建立了研究DNA氧化损伤修复的细胞模型；2．通过细胞细胞培养技术、 HPLC技术以及RealtimePCR技术研究了黄酮对LNCaP细胞发挥生理活性的浓度 效应及其机制。同时，基于以上结果初步探讨了其他黄酮对LNCaP细胞的生理活 性。 具体研究内容和结果包括： 一、LNCaP是一种荷尔蒙依赖性的前列腺癌细胞，相当于前列腺癌的早期阶 段，其细胞活性、氧化损伤修复能力等指标对了解、控制前列腺织病情的发展和恶 化具有重要意义，因此这个细胞系被用来作为我们的研究对象。通过细胞培养技术 研究了铁离了细胞毒性的剂量效应，利用HPLC技术研究了铁离了对细胞造成氧 中山大学博士学位论文：黄酮对人前列腺癌细胞DNA氧化损伤修复的牛理机制 中山大学博士学位论文：黄酮对人前列腺癌细胞DNA氧化损伤修复的牛理机制 化损伤的剂量效应，细胞修复氧化损伤的时间效应，确立了铁离子浓度及氧化损伤 检测条件，建立了研究氧化损伤修复的细胞模型； 二、通过HPLC技术系统性地检测了多种黄酮在牛理条件下的稳定性，并选 择了4，5，7一三羟基黄烷酮作为主要研究对象，利用细胞培养技术研究了其细胞毒 性作用，运用细胞培养技术和HPLC技术研究了其牛物利用度的时间效应和剂量 效应： 三、通过细胞培养技术、HPLC技术研究了4,5，7一二羟基黄烷酮对LNCaP细 胞发挥生理{乔性的浓度效应，利用Real time PCR技术研究了4’5，7一三羟基黄烷酮 对LNCaP细胞发挥生理活性的机制，证明4,5，7一三羟基黄烷酮确实可以通过促进 前列腺癌细胞DNA氧化损伤修复系统酶基因的表达而促进其损伤的修复； 四、利用细胞培养技术和HPLC技术初步探讨了其他黄酮对LNCaP细胞的牛 理活性。 结论及意义： 一、建立了研究人前列腺癌DNA氧化损伤修复的细胞模型，为以后关于这方 面的研究打下了基础： 二、系统性的研究了多种黄酮在牛理条件下的稳定性，提供了比较完善的关 于黄酮稳定性的背景资料，使黄酮的进一步研究成为可能； 二、首次研究了LNCaP细胞对4,5，7一三羟基黄烷酮生物利用度的时间和剂量 效应，对4，5，7一三羟基黄烷酮进一步的动物模型研究和l临床试验打下基础； 四、首次探讨了4，5，7一三羟基黄烷酮对DNA氧化损伤修复系统的促进作用 及其机制，提出了黄酮防止和抑制癌症的新理论： 五、研究了其他食品来源的黄酮对LNCaP细胞的生物活性，为进一步系统性 地研究某种黄酮以及黄酮综合性生理活性指明了方向。 关键词：前列腺癌，LNCaP细胞，黄酮，牛物利用度．DNA氧化损伤修复 1I Flavnonoids Flavnonoids Stimulate the Oxidative Damaged DNA Repair in Human Prostate Cancer Cell Line and Its Mechanism Abstact Prostate cancer is the most commonly diagnosed male malignancy and the second leading cause of male cancer death after lung cancer．Multiple factors have been implicated in the oncogen