黄芩苷联合顺铂对胶质瘤细胞增殖凋亡的实验研究-外科学专业毕业论文.docxVIP

三峡大学硕士学位论文 三 峡 大 学 硕 士 学 位 论 文 I I 三峡大学学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作 所取得的成果，除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经 发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明 确方式标明，本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。 学位论文作者签名： 日 期： 三峡大学研究生知识产权承诺书 本人承认：我作为三峡大学硕士研究生在校学习期间，在导师指导下，依据研究 工作所作学位论文的知识产权全部权归三峡大学所有。 本人承诺：我有义务维护三峡大学的知识产权，凡是以我本人学位论文内的全部 或部分研究成果，或实验数据为基础所形成的研究论文及成果，无论是以何种形式刊 发学术论文、进行成果鉴定或申报奖励，均以三峡大学为第一作者单位或完成单位， 并事先征得导师或学校相关部门的同意。 我愿承担因违背上述承诺而引起的一切法津和经济后果。 学位论文作者签名： 日 期： II II 内 容 摘 要 目的：体外观察黄芩苷(Baicalin)联合顺铂(Cisplatin, CDDP)对脑胶质瘤 U87 细胞株增殖凋亡的影响。 方法：(1)四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测黄芩苷与五种化疗药[顺铂(Cisplatin, CDDP)，5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-FU），阿霉素（Adriamycin，ADR），米托蒽 醌（mitoxantone，NVT），吡柔比星(pirarubicin, THP)]不同浓度单独及两者联合作 用对胶质瘤 U87 细胞增殖的影响，得到效应最强的组合。(2) 流式细胞术(flow cytometry, FCM)分析黄芩苷联合顺铂作用于胶质瘤 U87 细胞后，对细胞周期的影响。 (3) 逆转录聚合酶链式反应（PCR）检测黄芩苷联合顺铂作用于胶质瘤 U87 细胞后凋 亡相关基因（bcl-2,bax，Gli）的表达情况。 结果：(1) MTT 法检测结果显示，黄芩苷与顺铂联合用药对胶质瘤 U87 细胞增殖 的抑制作用最强，经过统计学分析，增殖抑制率差异与黄芩苷联合顺铂有较好的剂量 依赖性。 (2) 流式细胞仪分析细胞周期结果显示，G0/G1 期细胞比例随黄芩苷和顺铂 联合用药的浓度增高而增高，差异有统计学意义，说明联合应用黄芩苷和顺铂能够有 效将胶质瘤 U87 细胞阻滞在 G0/G1 期。(3) PCR 结果显示胶质瘤 U87 细胞经黄芩苷、 顺铂联合用药后凋亡促进基因 bax 的表达升高，抗凋亡基因 bcl-2、Gli 的表达下降。 结论：黄芩苷联合应用顺铂，能够有效抑制胶质瘤 U87 细胞的增殖，导致胶质瘤 U87 细胞细胞周期阻滞在 G0/G1 期，有效诱导胶质瘤 U87 细胞凋亡，使 bcl-2、Gli 的 表达下降，bax 的表达升高。且两种药物均呈良好的剂量依赖关系，联合用药作用强 于单独用药，两者具有相加作用。中药黄芩苷联合应用顺铂有望成为临床治疗胶质瘤 新的治疗方案。 关键词：黄芩苷 顺铂 胶质瘤 Gli PAGE III PAGE III Abstract Objective： To observe the effect of Baicalin combined with Cisplatin on the proliferation and apoptosis of glioma cell line U87 Methods：（1）The effects of Baicalin and five chemotherapy (CDDP, 5-FU,ADR,NVT THP) different concentrations of individual and plus on U87 cells were observed by MTT assay，and find the best combination (2) The effect of Baicalin combined with Cisplatin on U87 cells, cell cycle were analyzed by FCM assay.(3)The expression of the genes related with apoptosis such as Bcl-2,Bax,Gli on U87 cells after treated by Baicalin combined with Cisplatin by PCR assay. Results (1) MTT results showed that combination of Baicalin with Cis