蔓荆子化学成分及其含量测定方法研究-中药学专业毕业论文.docxVIP

目 录 引 言 1 第一部分 与蔓荆子有关的文献整理 3 1 本草学考证及原植物资源 3 1.1 本草考证 3 1.2 植物形态 3 1.3 本品性状 4 1.4 生物学特性 4 1.5 蔓荆子产地与分布 4 2 化学成分的研究 5 2.1 酚类 5 2.2 木脂素类 5 2.3 黄酮类 5 2.4 萜类 5 3 药理作用 6 3.1 镇痛作用 6 3.2 抗炎作用 6 3.3 降压作用 7 3.4 抗菌作用 7 3.5 祛痰作用 7 3.6 抗肿瘤作用 7 3.7 抗衰老作用 7 3.8 对微循环的作用 7 3.9 毒性作用 8 3.10 杀虫作用 8 4 炮制研究 8 5 质量评价研究 9 第二部分 蔓荆子化学成分的研究 10 1 仪器与材料 11 2 实验方法与结果 12 2.1 蔓荆子化学成分的提取与初步分离 12 2.2 石油醚萃取物中化学成分的分离 12 2.3 乙酸乙酯萃取物中化学成分的分离 13 2.4 正丁醇萃取物中化学成分的分离 16 3 化学成分的结构鉴定 16 3.1 化学成分的结构解析 16 3.2 化学成分的理化数据 18 4 讨论 21 4.1 HPLC 条件的优化 21 4.2 乙酸乙酯相 HSCCC 溶剂体系的优化 21 4.3 正丁醇相 HSCCC 样品的粗分 22 4.4 正丁醇相 HSCCC 逆流体系的选择 22 5 小结 22 第三部分 一测多评法同步测定蔓荆子中的四种化合物 23 1 仪器与试药 24 2 实验方法与结果 24 2.1 原理 24 2.2 色谱条件 24 2.3 对照品溶液的制备 25 2.4 线性范围考察 25 2.5 供试品溶液的制备 25 2.6 相对校正因子的计算 27 2.7 色谱系统精密度实验 28 2.8 供试品溶液稳定性实验 29 2.9 方法重复性实验 29 2.10 加样回收实验 30 2.11 相对校正因子的重现性考察 30 2.12 样品测定结果 31 3 讨论 32 4 小结 33 第四部分 本研究的创新点 34 第五部分 结 语 35 参考文献 36 附 录 40 致 谢 65 论文著作 66 PAGE PAGE 10 引 言 蔓荆子为马鞭草科牡荆属多年生落叶小灌木单叶蔓荆 (Vitex trifolia L. var simplicifolia Cham.)或蔓荆(vitex trifolia L.)的干燥成熟果实，主产于山东、江西、浙江、 福建、广东、广西及云南等地，属常用中药，具有疏散风热、清利头目的功效[1]，民 间常用于治疗感冒、头痛、周期性头痛及眼痛等。现代药理研究表明，蔓荆子中的黄 酮类化合物如蔓荆子黄素具有镇痛、抗炎[2]、抗肿瘤[3]的作用，蒿黄素具有扩张血管 的作用[4]，酚类化合物如对羟基苯甲酸对豇豆枯萎病菌有抑制作用[5]。 关于蔓荆子化学成分的研究，据文献报道，从中分离的化学成分主要有酚类、 木脂素类、黄酮类、萜类等。为了进一步寻找活性成分，加大对蔓荆子的开发利用， 本实验采用硅胶柱色谱法、高速逆流色谱法等分离手段对蔓荆子化学成分进行了研 究。特别是高速逆流色谱(High-speed counter-current chromatography, 简称 HSCCC) 是一种不用固态载体的液-液分配色谱，它根据样品在两相溶剂中分配系数的不同实 现样品的分离，避免了固相载体对样品的死吸附、变性等缺点，已广泛应用于天然产 物的分离纯化领域[6]。 2010 版药典以蔓荆子黄素的含量为指标对蔓荆子进行质量评价，规定不得小于 0.030%[7]。由于中药成分的复杂性，单一成分难以真正体现和评价中药的品质，由此， 有人采用多指标综合评价药材的质量，但由于中药化学对照品分离难度大、不稳定或 价格过高等因素，致使对照品一直处于供不应求的地步，目前该方法仅限于科研，难 以广泛应用到实际生产和销售中。王智民等利用高效液相色谱法中中药化学成分内在 函数和比例关系，提出了“一测多评”的想法，即只利用一个成分（对照品易得者）， 来实现对多个成分（对照品缺乏或难以供应）的同步测定[8]，并已成功运用于黄连[9]、 柴胡[10]、人参[11]等药材中。通过目前已发表的有关一测多评的文章，作者发现他们 仅是采用某一类化学成分，如黄酮类、生物碱、皂苷类等对相关药材进行质量评价， 由于中药成分的复杂性，一味中药往往含有几类化学成分，他们决定了中药药性的多 样性，如果仅用一类成分对其进行质量评价，只能片面地评价药材的质量。为了进一 步综合性的评价蔓荆子的质量，本文采用 3,4-二羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸、3,6