蜜炙黄芪化学成分分析及作用于脾气虚大鼠的药效学评价-中药学专业毕业论文.docxVIP

性声明 学位论文，系我个人在导师的指 导下进行研究工作所取得的成果。除文中己特别加 以标注和致谢的地 方外，不包含其 它个人或机构己经发表或撰写过的研究成果。对本研 究做出贡献的其 它个人和集体，均己在文中明确说明和致谢。本人充 分意识到本声明的法律结果完全由本人承担。 学位论文作者签名:}1精耕 日期:2ol 年 f 月还日 学位论文使用授权的声明 本人完全了解广东药学院有关保留和使用学 位论文的规定，学校 有权保留和向有关部门或机构送交本论文的复 印件和电子版，允许论 工:zzzr  复印手段保存和汇编本学位论文。 文被查阅和借阅。学校可以将本学位论文的全部或部 分内容编入有关 它 论文时名2 踏雪二 叫Ili叫?也L H 期210lrET二 r _s-月7日 广东药学院硕士研究生学位论文 广东药学院硕士研究生学位论文 目录 中文摘要I AbstractII 引言 1 第一章 文献综述 3 1.1 黄芪化学成分研究进展 3 1.2 黄芪药理作用研究进展 4 1.2.1 对免疫系统的影响 4 1.2.2 对心脏系统的影响 5 1.2.3 对缺血性脑损伤的保护作用 6 1.2.4 对血管和血液系统的作用 6 1.3 本研究的目的意义 6 第二章 蜜炙黄芪 UPLC/Q-TOF-MS 指纹图谱的建立及蜜炙前后化学成分的分析 8 2.1 引言 8 2.2 实验材料 9 2.2.1 实验药品及试剂 9 2.2.2 仪器和设备 9 2.3 实验方法 9 2.3.1 溶液的配制与样品的制备 9 2.3.2 UPLC/Q-TOF MS 分析 10 2.3.3 数据预处理及模式识别分析 12 2.4 实验结果 12 2.4.1 精密度、重复性和稳定性实验结果 12 2.4.2 UPLC/Q-TOF MS 分析获得的总离子流图 13 2.4.3 黄芪及蜜炙黄芪水提物的质谱鉴定结果 15 2.4.4 黄芪和蜜炙黄芪水提物中化学成分的半定量分析 20 2.4.5 黄芪蜜炙前后化学成分的多元统计分析 21 2.5 结果讨论 24 2.5.1 色谱条件的优化 24 2.5.2 质谱参数的选择 24 2.5.3 色谱柱的选择 24 2.5.4 黄酮类的鉴定 25 2.5.5 皂苷类的鉴定 26 2.5.6 蜜炙后化学成分变化的分析 27 2.6 本章小结 28 第三章 黄芪及蜜炙黄芪水提物对脾气虚大鼠的干预作用 29 3.1 引言 29 3.2 实验材料 30 3.2.1 实验药品及试剂 30 3.2.2 仪器和设备 30 3.2.3 实验动物 30 3.2.4 试剂的配制 31 3.3 实验方法 31 3.3.1 脾气虚大鼠模型的建立 31 3.3.2 黄芪及蜜炙黄芪水提物对脾气虚大鼠的干预 32 3.3.3 观测指标及检测方法 32 3.3.4 统计学方法 33 3.4 实验结果 33 3.4.1 给药剂量的确定 33 3.4.2 造模实验结果及分析 33 3.4.3 药物干预实验结果及分析 36 3.5 结果讨论 40 3.5.1 脾气虚模型建模方法的选择 40 3.5.2 脾气虚模型的评价 40 3.5.3 蜜炙黄芪对脾气虚证的药效学评价 40 3.6 本章小结 42 第四章 结论、创新点与展望 43 4.1 结论 43 4.3 展望 44 参考文献 45 攻读硕士期间发表的论文 54 致谢 55 中文摘要 黄芪是我国传统中医药常用滋补中药材，其蜜炙品较生品的补中益气作用显 著提高，临床常用蜜炙黄芪替代黄芪生品以提高其补气疗效。但蜜炙黄芪有效化 学成分及对应的药效学关系尚不明确。本研究旨在考察黄芪蜜炙前后的化学成分 的变化，并对其水提物作用于脾气虚大鼠模型的药效学作用进行分析与评价。 实验运用 UPLC/Q-TOF MS 技术对黄芪蜜炙前后的化学成分进行分析与鉴 定；采用多元统计方法，包括 PCA、PLS-DA 对蜜炙前后化学成分进行模式识别 分析，通过 VIP 值筛选出具有蜜炙前后差异性的化学成分；采用疲劳加限制饮食 的方法建立中医脾气虚大鼠模型，考察黄芪蜜炙品和生品水提物对该大鼠模型白 细胞数、淋巴细胞数和相关细胞因子等生理生化指标的影响。 蜜炙黄芪的 UPLC/Q-TOF MS 分析共鉴定出 35 个化合物，包括黄酮类 17 个， 皂苷类 13 个；多元统计分析筛选出 9 个蜜炙前后差异性化学成分，其中毛蕊异 黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷-6’’-O-丙二酰酯含量显著减少，而毛蕊异黄酮-7-O-β-D- 葡萄糖苷的含量有所提高；建立的脾气虚模型大鼠的体重、血清 D-木糖吸收量、 白细胞数和淋巴细胞数显著减少。黄芪蜜炙品、生品水提物干预后模型组大鼠的 体重、白细胞数和淋巴细胞数得以恢复，且蜜炙