螺内酯对醛固酮诱导的脐静脉内皮细胞血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)mRNA表达的影响-内科学专业毕业论文.docxVIP

安徽医科大学硕士学位论文 安徽医科大学硕士学位论文 PAGE PAGE 1 英文缩略词表 Abbreviation 英文缩写 英文全称 中文名称 LOX-1 Lectin-like oxidizedlow-densitylipoproten receptor 1  血凝素样氧化低密 度脂蛋白受体 1 ox-LDL Oxidized low density Lipoprotein 氧化低密度脂蛋白 ALD aldosterone 醛固酮 SPIRO spironolactone 螺内酯 POLY(I) polyinosinic cytidylic caid 多聚肌苷酸 AS Atherosclerosis 动脉粥样硬化 AngⅡ AngiotensinⅡ 血管紧张素Ⅱ LDL-R 1ow-density lipoprotein receptor 低密度脂蛋白受体 NO Nitric oxide 一氧化氮 ApoE Apolipoprotein E 载脂蛋白 E 促分裂原活化蛋白 MAPK Mitogenactivated protein Kinases 激酶 PKC Protein kinase C 蛋白激酶 C PTK Protein tyrosine kinase 蛋白酪氨酸激酶 NF-κB Nuclear factor κB 核因子κB ROS Reactive oxygen species 反应性氧簇 HMG CoA 3-hydroxyl-3-Aglutarie usions coenzyme A PPAR-γ peroxisomeproliferator-activated receptor-γ G6PD Glucose-6-phosphate Dehydrogenase  3- 羟 基 -3- 甲 戊 二 酰辅酶 A 过氧化酶体增生物 激活受体-γ 葡萄糖 6 磷酸脱氢 酶 NOS Nitric oxide synthase 一氧化氮合成酶 VCAM Vascular cell adhesion molecule 血管细胞粘附分子 ICAM Intercellular adhesion molecule 细胞间粘附分子 MCP Monocyte chemotactic protein 单核趋化蛋白 金属蛋白酶的组织 TIMP Tissue inhibitors of metalloproteinases 抑制因子 MMPs metalloproteinases 基质金属蛋白酶 AT1 Angiotensin receptor-1 血管紧张素受体 1 MR Mineralocorticoid receptor 盐皮质激素受体 螺内酯对醛固酮诱导的脐静脉内皮细胞血凝素样氧化 低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）mRNA 表达的影响 中文摘要 目的：通过体外培养脐静脉内皮细胞，给予药物（螺内酯）及 LOX-1 化学拮抗剂 （聚肌苷酸）作用，并加以醛固酮诱导，观察药物组、化学拮抗剂组及阴性对照 组、阳性对照组之间血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）的 mRNA 表达的 差异，从而证明醛固酮拮抗剂螺内酯对脐静脉内皮 LOX-1 基因表达的影响，并进 一步探讨这种作用对于某些心血管疾病可能的预防及延缓作用。 方法：实验于 2011 年 5 月至 2011 年 10 月在安徽医科大学第一附属医院中心实验 室完成。①购买脐静脉内皮细胞株，HUVECs(ECV304)购自南京凯基生物公司，在 中心实验室常规传代培养。用凯基-1640 培养基+20%胎牛血清（南美 HYCLON 公司）， 37 ℃、5% CO2 条件培养。待细胞生长成单层达 90%培养面积后，用 0.25%胰酶消化 液消化、传代、冻存。2～5 代 HUVECs 用于实验。②将培养细胞分别按细胞处理方 式不同分为 6 组 阴性对照组：普通 1640 培养基(A 组)；不同浓度 ALD 组：分别加 入不同浓度 ALD（10、100、1 000 nmol/L,分别为 B、C、D 组）；ALD+PolyI 组（E 组）：先用 Poly I（250 mg/L）预先处理 2 h 后再以 1 000 nmol/L ALD 共同培养 24 h；ALD+Spiro 组（F 组）用 1 000 nmol/L ALD+1μmol/L Spiro 二者共培养 24h， ③用 2～5 代 HUVECs 以 2×104 接种于 24 孔板，培养约 48 h 左右待细胞汇集成单 层达 80%培养面积，换无血清 1640 培养基饥饿培养 12 h 后按不同分组及方法加药， 各组细胞与药物共培养 24 h 后收获细胞④药物作用 24 h 后收集细胞，用