慢性特发性血小板减少性紫癜患者血小板差异蛋白质的初探-内科学专业毕业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 Preliminary investigation of differential expressed proteins in platelets of adult patients with chronic idiopathic thrombocytopenic purpura A Dissertation Applying for the Master Degree of Medicine By Yuanyuan Zhou Under the Guidance and Supervision of Prof. Jun Yin Shantou University Medical College May 2014, Shantou, Guangdong, China 学位论文原创性声明 本论文是我个人在导师指导下进行的工作研究及取得的研究成 果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或其它 机构已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和 集体，均已在论文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律 责任由本人承担。 作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文使用授权声明 本人授权汕头大学保存本学位论文的电子和纸质文档，允许论文 被查阅和借阅；学校可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据 库进行检索，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存和汇编论文； 学校可以向国家有关部门或机构送交论文并授权其保存、借阅或上网 公布本学位论文的全部或部分内容。对于保密的论文，按照保密的有 关规定和程序处理。 本论文属于：保密（ ），在 年解密后适用本授权声明。 不保密（ ）。 （请在以上括号内打“√”） 作者签名： 导师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日 学位论文知识产权声明 本人郑重声明：我所提交答辩的学位论文，是本人在导师指导下 完成的成果，该成果属于汕头大学医学院，受国家知识产权法保护。 本人在毕业离校前会将有关的研究资料和结果全部上交导师，离校后 使用与学位论文相关的数据资料参加学术会议、公开报告、发表论文 和申请基金等，须征得导师及导师所在单位的同意。不得擅自对外披 露本论文尚未公开的研究成果。本人完全意识到本声明的法律责任由 本人承担。 注：保密的学位论文在解密后适用本声明。 研究生签名： 日期： 年 月 日 导师签名： 日期： 年 月 日 汕头大学医学院硕士学位论文 摘 要 特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thrombocytopenic purpura，ITP）是临床 常见的出血性疾病，约占出血性疾病总数的30%，临床表现为无明显外源性病因的血小板 数量减少从而引起广泛皮肤粘膜和内脏出血，颅内出血是本病的致死病因。根据出血时间 长短可分为急性型和慢性型，急性型通常发生在儿童，病程呈自限性，一般不超过6个月， 慢性型多发生在青年女性，很少能自行缓解（自行缓解率≤5%），常持续数年。临床上给 予肾上腺皮质激素、静脉注射丙种免疫球蛋白、利妥昔单抗等免疫抑制剂、促血小板生成 素等促进血小板生成药物治疗后，急性ITP患者多数都能治愈，慢性ITP患者的血小板计数 虽然能上升，但在药物减量或停药后，病情又复发，往往表现为间歇性发作与缓解交替。 虽然国内外学者普遍认为慢性ITP的发病机制主要与免疫反应及血小板成熟障碍有关，但 详细的发生过程并不清楚，而且慢性ITP的治疗效果欠佳，所以深入研究慢性ITP的发病机 制极为重要，本论文采用相对和绝对定量的同位素（isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ）标记技术观察正常人与慢性ITP患者血小板的差异蛋白质 变化，从蛋白质组学的角度揭示慢性ITP的发病机制，为临床防治慢性ITP提供新的理论依 据。 【目的】 比较慢性特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者与健康对照者的血小板的蛋白质表达 的差异，在蛋白质组学水平探讨慢性ITP的发生机制。 【方法】 从血液内科临床病例中收集10例慢性ITP患者的外周血，同时收集10例健康对照者的 外周血。分别提取10例慢性ITP患者和10例健康对照者的富含血小板的血浆（PRP）,建立 样本池，提取慢性ITP患者和健康对照者的血小板总蛋白，用蛋白酶酶解蛋白，采用相对 和绝对定量的同位素标记肽段，经强阳离子交换色谱分离肽段和反相色谱除盐纯化肽段后 进行质谱检测，得到质谱图并将其输入到PD（Proteome Discoverer 1.3，thermo）软件， 软件先对质谱谱图进行筛选，PD提取后的谱图用mascot进行搜索，搜索结束后，PD软件根 据mascot搜索结果和第一步筛选后的谱图进行定量分析，得到可信的蛋白质鉴