抗菌药物对布鲁氏菌最低抑菌浓度、防突变浓度的研究生物化学与分子生物学专业毕业论文.docxVIP

内 内蒙古科技大学硕士学位论文 I I 摘 要 布鲁氏菌病是人畜共患的传染病，是由布鲁氏菌侵染机体而引发的自然防疫源 性疾病。该病抗菌药物治疗的疗程较长，患者难以坚持用药，易导致耐药情况出 现，且有部分患者在患有布鲁氏菌病的同时还伴随着其它细菌感染症状发生。如何 选用抗菌药物有效地治疗布鲁氏菌病已是亟待解决的问题。本研究通过分离、鉴定 布鲁氏菌病病人血液中的细菌，以判断病人在感染布鲁氏菌的同时是否存在其它细 菌感染情况的发生；同时测定临床常用抗菌药物及新型抗菌药物对布鲁氏菌的最低 抑菌浓度（MIC）、防突变浓度（MPC），为临床治疗提供抗菌药物用药参考。 本文以从乌兰察布市四子王旗中心医院及大口子村提取的布鲁氏菌病确诊病例 及疑似病例的 8 个血样作为样本，对血液中的细菌进行分离；提取菌体基因组 DNA， 用布鲁氏菌属的特异性引物 eri 进行 PCR 鉴定以判断所分离出的细菌是否为布鲁氏 菌属；对基因组 DNA 进行 16S rDNA PCR 扩增，将 PCR 产物 16S rDNA 测序并将测序 结果输入至 NCBI 数据库中进行序列比对，结果共分离出 19 株、9 种不同类型细菌。 因此在治疗布鲁氏菌病时应先进行血液细菌培养，以确定所感染的菌体类型，从而 选出最优的抗菌药物用药方案。 采用 CLSI（美国临床实验室标准化协会）规定的肉汤稀释法对布氏杆菌活疫 苗 S2 株进行抗菌药物的 MIC 检测。各种药物的 MIC 值分别为：硫酸庆大霉素 0.470μg/mL 、硫酸卡那霉素 1.362μg/mL 、利福平 1.821μg/mL 、 硫 酸 链 霉 素 1.700μg/mL、四环素 2.710μg/mL、莫西沙星 0.298μg/mL。与其余 5 种药物相比，第 四代喹诺酮类药物莫西沙星的 MIC 值最低，抑菌能力最强。氨基糖苷类抗菌药物 中，硫酸庆大霉素的 MIC 值最低，硫酸链霉素的 MIC 值最高。 通过琼脂稀释法，分别进行了硫酸庆大霉素、硫酸卡那霉素、利福平、硫酸链 霉素、莫西沙星对布氏杆菌活疫苗 S2 株的 MPC 及耐药选择性指数 SI 的检测。以上 五种药物中莫西沙星的 MPC 值最低，利福平的 MPC 值最高；硫酸庆大霉素的 SI 值最 低，利福平的 SI 值最高。莫西沙星、硫酸庆大霉素抑制细菌耐药的能力要优于硫酸 卡那霉素、利福平、硫酸链霉素。研究表明：MPC 值低的药物其 SI 值不一定也低， 同类型抗菌药物的 MPC、SI 值存在差异。因此对于作用机理相类似的同类抗菌药物 而言，仍然需要检测药物的 MPC、SI 值；在选择治疗药物时需同时参考抗菌药物的 MPC 及 SI 值， 选用 MPC、SI 值均较低的药物进行治疗。 关键词：布鲁氏菌病；血液细菌分离、鉴定；布鲁氏菌；最低抑菌浓度；防突变浓 度；耐药选择性指数 II II Abstract Brucellosis is a zoonosis which is caused by Brucella bacteria infection. The antibiotic therapy requires long time treatment that makes it difficult for patients to adhere to the medication; this situation will easily lead to the emergence of drug resistance. In the meanwhile, some patients suffering from brucellosis may have symptoms of other bacterial infection. Therefore, how to choose antimicrobial agents for the effective treatment of brucellosis is a problem which is required to solve immediately. In this study, the separation and identification of bacteria in the blood of brucellosis patients were conducted to diagnose whether a patient infected by Brucella would have symptoms of other bacterial infections at the same time. For the purpose of prevention of drug resistance,