罗格列酮对体外培养人肝癌SMMC7721细胞生长的影响-肿瘤学专业毕业论文.docxVIP

PAGE PAGE 10 罗格列酮对体外培养人肝癌 SMMC7721 细胞生长的影响 研究生： 郑爱红 导 师： 庄英帜教授 副导师： 曹建国教授 中 文 摘 要 目的 探 讨 过 氧 化 物 酶 体 增 殖 因 子 活 化 受 体 γ （ Peroxisome Proliferator-actived Recepter PPARγ）配体罗格列酮（Rosiglitazone,RSG）体外抑 制人肝癌SMMC7721细胞系细胞生长作用及初步探讨其作用机制。 方法 体 外 培 养 人 肝 癌 SMMC7721 细 胞 ， 以 全 反 式 维 甲 酸 (All-trans retinoic,ATRA)为阳性对照药，MTT比色试验测定药物对细胞生长的影响，流式 细胞术（Flow cytometry,FCM）检测细胞周期和细胞凋亡，分光光度法测定γ-GT 变化,ELISA检测AFP分泌量,免疫细胞化学检测药物处理前后PPARγ,CyclinD1蛋 白表达的改变。 结果 不同浓度的 RSG（12.5、25、50、100 μmol/L）和 10 μmol/L 的 ATRA 处理细胞后抑制肝癌 SMMC7721 细胞生长，RSG 抑制肝癌 SMMC7721 细胞生 长呈时间依赖性和浓度依赖性；γ-GT 量明显下降,AFP 分泌显著降低;G1 期细胞 数目增加，S 期和 G2 数目减少，而凋亡率无明显改变；细胞的 PPARγ 蛋白核内 表达上调，CyclinD1 蛋白表达下调。 结论 过 氧 化 物 酶 体 增 殖 因 子 活 化 受 体 γ(PPARγ) 配 体 罗 格 列 酮 （Rosiglitazone,RSG）具有抑制体外培养肝癌SMMC7721细胞生长作用；罗格列 酮对SMMC7721细胞生长抑制作用与其阻滞细胞周期和诱导细胞分化相关； PPARγ蛋白核内表达上调、CyclinD1蛋白表达下调可能介导了RSG抑制细胞生长。 【关键词】：肝脏肿瘤；罗格列酮；分化；PPARγ Effect of Rosiglitazone on the Growth of Hunman hepatocarcinoma cells in virto Abstract Objective To investigate the effect of Rosiglitazone ， the ligand of Peroxisome Proliferator-activated Receptor gamma，on cell proliferation inhibition of hepatocarcinoma cells in vitro and its possible mechanism. Methods Human hepatocarcinoma SMMC7721 cell line was cultured in vitro, Cultured SMMC7721 cells were designed into 12.5μmol/L RSG group, 25μ mol/L RSG group, 50μmol/L RSG group, 100μmol/L RSG group and the control group，10μmol/L ATRA group. Proliferation inhibition effect was tested by MTT assay; Flow cytometry was used to detect cell cycle and apoptosis rate; The activity of γ-GT was measured with γ-GT kit and the secretive AFP was measured with ELISA ; Expression of PPARγ、CyclinD1 protein in hepatocarcinoma cells between untreated and treated with or without Rosiglitazone were observed by immunohistochemistry. Results Rosiglitazone at various concentrations of 12.5、25、50、100 μmol/L and All-trans retinoic acid at concentration 10 μmol?L-1 could inhibit the proliferation of SMMC7721 cells, RSG inhibit the proliferation in a d