灭多威对乙酰胆碱酯酶及大鼠神经系统的影响-卫生毒理学专业毕业论文.docxVIP

独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究 成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已 经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确 方式标明。本人完全意识到，本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留 并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授 权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采 用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本论文属于 保密 ， 在 年解密后适用本授权数。 不保密 。 （请在以上方框内打“√”） 学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日 目 录 中英文缩略词表 1 摘 要 2 Abstract 5 前 言. 9 第一部分 灭多威对红细胞膜及不同脑区突触体乙酰胆碱酯酶的作用 14 材料与方法 14 结 果 17 讨 论 23 第二部分 灭多威对大鼠乙酰胆碱酯酶和神经系统的影响 27 材料与方法 27 结 果 30 讨 论 39 小 结 42 参考文献 43 综 述 49 参考文献 54 致 谢 58 华 中科技大学硕士学位论 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 PAGE PAGE 1 中英文缩略词表 AChE IC50 Acetylcholinesterase Half Maximal Inhibitory Concentration 乙酰胆碱酯酶 半数抑制浓度 Ki IOD Bimolecular Rate Constant Integral Optical Density 双分子速率常数 积分光密度 LD50 CHE Median Lethal Dose Cholinesterase 半数致死量 胆碱酯酶 MDA Malonal Dehyde 丙二醛 GSH Reduced Glutathione 还原性谷胱甘肽 SOD Superoxide Dismutase 超氧化物歧化酶 TBA Thiobarbituric Acid 硫代巴比妥酸 DTNB 5,5-Dithiobis-(2-nitrobenzoic acid） 5,5-二硫代双硝基苯甲酸 ROS Reactive Oxygen Species 活性氧 NOS Nitricoxide Synthase 一氧化氮合酶 BChE Bcetylcholinesterase 丁酰胆碱酯酶 XO Xanthine Oxidase 黄嘌呤氧化酶 GSH-Px Glutathione Peroxidase 谷胱甘肽过氧化物酶 iNOS Inducible Nitric Oxide Synthase 内诱生型一氧化氮合酶 Km Michaelis Constant 米氏常数 PBS Phosphate Buffered Saline 磷酸盐缓冲液 ACh Acetylcholine 乙酰胆碱 ·OH Hydroxy Radical 羟基自由基 EDTA Ethylenediamine Tetraacetic Acid 乙二胺四乙酸 SD Deviations of Variance 标准差 灭多威对乙酰胆碱酯酶及大鼠神经系统的影响 硕士研究生 ：赵 飞 指 导 老 师：石 年 教授 摘 要 灭多威（Methomyl）作为氨基甲酸酯类农药，由于其杀虫谱广、毒性高、杀虫效果 好等特点被广泛用于棉花、果树和蔬菜的病虫害防治，随着其广泛应用，一方面在环境 中多发现其残留，另一方面灭多威中毒事件也时有发生，给人们的健康造成了严重的威 胁。 对灭多威的研究多集中在胆碱酯酶的抑制方面，本次研究拟探讨灭多威对大鼠神经 系统的影响，共分为两个部分。第一部分在体外条件下，提取红细胞膜和大鼠脑突触体， 分别探讨灭多威对人红细胞膜、鼠红细胞膜、鼠脑皮层突触、小脑突触、海马突触和纹 状体突触乙酰胆碱酯酶活力的抑制作用及其差异，并对抑制作用类型进行了判定；第二 部分在大鼠体内条件下，建立灭多威急性经口重复剂量染毒模型，首先从整体水平上利 用神经行为学方法评定灭多威对大鼠神经行为的影响，并通过组织病理学方法观察大鼠 神经结构的改变，再从分子水平上检测灭多威染毒对大鼠乙酰胆碱酯酶和氧化抗氧化体 系的影响。体外实验和体内实验相结合，观察灭多威对乙酰胆碱酯酶的影响，并从氧化 应激的角度对灭多威中毒机制进行了探讨。 第一部分 灭多威对红细胞膜及不同脑区突触体乙酰胆碱酯酶的作用 目的：体外条件下研究灭多威对不同