梅山猪和杜洛克猪精子活力和蛋白磷酸化比较研究-畜牧学专业毕业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 上海交通大学 学位论文原创性声明 本人郑重声明:所呈交的学位论文《梅山猪和杜洛克猪精子活 力和蛋白磷酸化比较研究 ，是本人在导师的指导下，独立进行研究 工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任 何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出 重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本人完全意识 到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名:咐乓多亿 日期:洲带年/月/).日 万方数据 万方数据 上海交通大学 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定， 同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版， 允许论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可以将本学位论文的 全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫 描等复制手段保存和汇编本学位论文。 保密口，在一一年解密后适用本授权书。 本学位论文属于  不保密tsi (请在以上方框内打叫) 学位论文作者签名:明二东 指导教师签名:马封和 日期:ìOl吁年 j 月 1)日 日期:对{阵 f 月/飞回 上海交通大学硕士学位论文 上海交通大学硕士学位论文 万方数据 万方数据 梅山猪和杜洛克猪精子活力和蛋白磷酸化比较研究 摘 要 梅山猪和杜洛克猪是育种生产中常选用的优质猪种，二者繁殖性 能存在显著差异，其根本原因尚未确定。有关其繁殖性能差异的探讨 主要集中在两个品种间母畜的乳头数、乳房发育、公猪睾丸形态学及 精子发生相关方面，而公猪精子活力等繁殖指标鲜有报道。由于哺乳 动物精子是高度分化的细胞，基本上没有转录和翻译功能，而精子蛋 白磷酸化修饰对于激发精子顶体反应以及维持超激活运动具有重要的 意义，亦是完成精卵结合的重要保证。本研究以精子活力参数及蛋白 磷酸化特性为分析测试指标，对比梅山猪和杜洛克猪精子活力和蛋白 磷酸化程度的差异性，探讨二者繁殖差异性可能的诱导因素，为相关 分子机制研究提供理论依据。本研究的结果如下： 1、猪获能精子 20KDa、25KDa、35~37KDa、55KDa 的底物磷酸 化水平高于未获能精子的蛋白磷酸化；猪获能精子 25KDa、30~40KDa、 55KDa 和 75KDa 分子量蛋白的酪氨酸磷酸化程度也强于未获能猪精 子。cAMP（1mM）和 IBMX（0.1mM）能促进 25KDa 和 55KDa 分子 量蛋白 PKA 底物磷酸化上调且表现出时间依赖性。H-89 抑制猪精子 25KDa~37KDa 分子量和 50~75KDa 蛋白磷酸化，说明猪精子获能过程 中蛋白磷酸化调控符合 sAC/cAMP/PKA 信号通路。 2、PKA 底物磷酸化处于上调或抑制状态时，其相对应的精子活 力及 VCL 参数指标也呈增加或是下降趋势，结果提示猪精子获能过程 中 PKA 底物磷酸化与精子活力具有正相关性。 3、免疫荧光证实猪获能精子 PKA 底物磷酸化主要发生在顶体帽、 顶体后端和尾部（中段、主段以及尾段）；而蛋白酪氨酸磷酸化主要发 生在植入窝和尾部，且中段酪氨酸磷酸化程度较高。 I 4、梅山猪和杜洛克猪精子活力参数指标存在显著差异，梅山猪获 能精子运动能力的参数 VCL（212.4 um/s）显著大于杜洛克猪的获能 精子（195.7um/s ）（P0.05）。 5、梅山猪与杜洛克猪的获能精子的蛋白 PKA 底物磷酸化发生时 间不具有同步性，特别是与精子活力具有密切关系的 270KDa 蛋白磷 酸化，在精子获能培养 1.5 小时后梅山猪精子 270KDa 蛋白磷酸化水平 明显高于杜洛克猪精子；梅山猪获能精子 150KDa 蛋白酪氨酸磷酸化 也强于杜洛克猪精子。 本研究结果提示：梅山猪与杜洛克猪精子获能过程中 PKA 底物磷 酸化及活力指标的差异性可能是导致两个猪种繁殖性能不同的原因之 一。 关键词：梅山猪，杜洛克猪，精子获能，超激活运动，蛋白磷酸化， 活力参数，繁殖性能 II 万方数据 万方数据 THE DIFFERENCES IN SPERM MOTILITY AND PROTEIN PHOSPHORYLATION BETWEEN MEISHAN BOAR AND DUROC BOAR ABSTRACT Meishan boar and Duroc boar are high quality of pigs in breeding production with significant differences in reproductive performance. The reason of the differences is unknown. The investigation in reproductive performa