抗氧化剂对燃煤型氟中毒大鼠睾丸组织脂质过氧化损伤拮抗作用的实验研究-外科学(泌外)专业毕业论文.docxVIP

贵阳医学院 贵阳医学院 2012 届研究生论文 PAGE PAGE 10 抗氧化剂对燃煤型氟中毒大鼠睾丸组织脂质过氧化损伤 拮抗作用的实验研究 专业：外科学（泌外），研究生：任鹏，导师：孙发 中文摘要 目的：研究抗氧化剂对燃煤型氟中毒大鼠睾丸组织氧化应激损伤的拮抗作用及其 机制，并比较不同抗氧化剂的作用，探索治疗氟中毒较为有效的药物。 方法：选用雄性 SD 大鼠 30 只，体重 90-110g，按体重随机分为 6 组（每组 5 只）， 分别为：对照组、低氟组、中氟组、高氟组、高氟+维生素 E 组、高氟+番茄红素 组。各染氟组喂饲含不同比例的燃煤型氟中毒病区煤烘玉米饲料，建立燃煤型氟 中毒动物模型。于实验第 90 天处死大鼠，处死前一周收集大鼠尿液，测定尿氟 含量；采用股动脉放血法处死大鼠，取出睾丸后，立即放入液氮中保存。用相应 试剂盒检测睾丸组织中丙二醛（MDA）含量、总超氧化物歧化酶（T-SOD）活力、 还原型谷胱甘肽（GSH）含量、原位缺口末端标记（TUNEL）染色，观察生精细胞 凋亡的情况。 结果：成功建立大鼠氟中毒动物模型，各染氟组大鼠尿氟均明显高于对照组 （P0.05），随着染氟剂量的增加而增加。加入维生素 E 及番茄红素组尿氟含量 明显低于高氟组（P0.05），差异具有统计学意义。各染氟组大鼠睾丸组织中 MDA 含量明显高于对照组（P＜0.05），随着染氟剂量增加有上升趋势。加入维生素 E 及番茄红素后，大鼠睾丸组织中 MDA 含量与高氟组相比明显下降（P＜0.05），差 异具有统计学意义。各组大鼠睾丸组织中 T-SOD、GSH 活力与对照组相比明显下 降（P＜0.05），随着染氟剂量的增加呈下降趋势；加入维生素 E 及番茄红素后， 大鼠睾丸组织中 T-SOD 及 GSH 含量较高氟组明显升高（P＜0.05），差异具有统计 学意义。各染氟组单位生精小管细胞凋亡指数（AI）明显高于对照组（P0.05 或 0.01）；各染氟组生精细胞凋亡指数随染氟剂量的增加呈升高趋势，且各染氟 组间差异具有统计学意义（P0.05）；加入维生素 E 及番茄红素后，药物干预组 的凋亡指数较高氟组降低（P0.05）；番茄红素组凋亡指数低于维生素 E 组，差 异具有统计学意义，对照组生精细胞偶见有凋亡发生 结论：慢性燃煤型氟中毒可致大鼠睾丸组织内氧化应激产生大量脂质过氧化产 物，从而导致生殖功能损害。番茄红素及维生素 E 可能通过抗氧化损伤保护慢性 燃煤型氟大鼠生殖功能。 关键词：燃煤型氟中毒；氧化应激；生殖功能；维生素 E；番茄红素 英文缩写 缩略词表 英文名称 中文名称 T-SOD SCF MDA GSH NO OD PBS SOD T-SOD GSH-Px BCA CAT DNA T-vitality of SOD stem cell factors malondialdehyde reduced glutathione hormone nitric oxide optical density phosphate buffered solution superoxide dismutase total superoxide dismutase glutathione peroxidase 2,2′-Bicinchoninic acid Catalase deoxyribonucleic acid 总超氧化物歧化酶 睾丸干细胞因子 丙二醛 还原型谷胱甘肽 一氧化氮 吸光度 磷酸盐缓冲溶液 超氧化物歧化酶 总超氧化物歧化酶 谷胱甘肽过氧化物酶 4,4′二羧酸-2,2′-喹啉 过氧化氢酶 脱氧核糖核酸 前 言 我国被称为世界上最大的地方性氟中毒多发带。据调查，我国地方性氟中毒 分布于1300多个县，暴露于高氟环境中的人口约2．6亿人。贵州省是地氟病发病 情况最严重的省份之一，主要分布在贫困落后地区，全省50%的县有地氟病流行。 氟中毒分为饮水型、燃煤污染型、饮砖茶型三种，其中以饮水型最为多见，而贵 州省是以燃用高氟煤污染环境和食物而引起的燃煤型氟中毒为主。 研究发现[1]，燃煤型氟中毒可引起大脑、骨骼、牙齿、肾脏、睾丸、甲状腺 等器官发生病变。近年来，氟中毒对男性生殖的影响逐渐引起人们的高度重视。 有研究表明，机体摄入过量氟可导致睾丸生精功能降低，使精液质量下降，不育 率升高[2]。本课题组前期研究发现，过量氟导致大鼠睾丸生精细胞的结构和功能 受损，生精细胞凋亡率增加，雄性大鼠生殖内分泌激素紊乱[3-6]。有学者提出氧 化应激学说，认为氧化应激是氟中毒机制中一个重要的环节[7]，过量氟导致机体 氧化系统/抗氧化系统失衡，氧自由基代谢紊乱，对靶器官组织产生了氧化应激 损伤[8]。MDA是脂质过氧化物的生成产物，其含量可间接反映睾丸组织自