氯化锂抑制GSK-3β对奥曲肽作用于Wntβ-Catenin通路的影响-外科学专业毕业论文.docxVIP

PAGE PAGE 10 英文缩写 英文全称 中文名称 TEMED N,N,N′,N′-tetramethyl-ethlene diamine 四甲基乙二胺 TBE Tris/borate/ EDTA(buffer) Tris/硼酸/EDTA 缓冲液 FCS S.D Fetal calf serum Standand Deviation 小牛血清 标准差 氯化锂抑制 GSK-3β对奥曲肽作用于 Wnt/β-Catenin 通路的 影响 研 究 生：黄中华 导 师：梁庆模 教授 中文摘要 目的 研究氯化锂抑制 GSK-3β活性后，生长抑素类似物奥曲肽对结肠癌 SW480 细 胞 Wnt/β-Catenin 信号传导通路抑制作用的变化，以进一步明确 GSK-3β在生 长抑素抑制 Wnt/β-Catenin 通路中的作用。阐明生长抑素的抗肿瘤机制，为寻 找具有开发前景的 Wnt 信号通路候选药物提供实验和理论依据。 方法 以 SW480 细胞为实验对象，设置对照组、奥曲肽低浓度组（10-10M）、奥曲 肽高浓度组（10-6M）、LiCl 组、奥曲肽低浓度+LiCl 组（10-10M+20mM）、奥曲 肽高浓度+LiCl 组（10-6M+20mM），共六个组，分别定为 A、B、C、D、E、F 组。 Western blot 方法测定各组细胞 Wnt/β-Catenin 信号传导通路中关键因子 β-Catenin、pβ-Catenin 及下游靶基因 C-myc、CyclinD1 蛋白表达, 以明确奥 曲肽是否通过上调 GSK-3β蛋白的活性，从而抑制该信号通路的作用。 结果 1. 奥曲肽（10-6、10-10M）对 SW480 细胞 β-Catenin, c-myc, cyclin D1 蛋白表 达有明显抑制作用，对 pβ-Catenin 蛋白表达有明显上调作用，与对照组比较差 异有显著性（P＜0.05） 2. 与单用奥曲肽（10-6M、10-10M）相比，奥曲肽高浓度+LiCl 组及低浓度奥 曲肽+LiCl 组 SW480 细胞中的 β-Catenin 蛋白表达上调，pβ-Catenin 蛋白表达下 调，差异有显著性（P＜0.05）。与对照组比较，奥曲肽+LiCl 组 SW480 细胞 β-Catenin 蛋白、 pβ-Catenin 蛋白无显著性差异（P＞0.05）。 3.与单用奥曲肽（10-6M、10-10M）相比，奥曲肽高浓度+LiCl 组及奥低浓度 曲肽+LiCl 组 SW480 细胞中的 c-myc, cyclin D1 蛋白表达上调，差异有显著性（P ＜0.05）；与对照组比较，奥曲肽+LiCl 组 SW480 细胞 c-myc, cyclin D1 蛋白无显 著性差异（P＞0.05）。提示 LiCl 抑制了奥曲肽对 Wnt/β-Catenin 信号传导通路的 作用。 结论 1. 奥曲肽能抑制结肠癌 SW480 细胞 Wnt/β-Catenin 信号通路，可使 β-Catenin 及下游靶基因蛋白表达下调，pβ-Catenin 蛋白表达上调。 2. 氯化锂可抑制奥曲肽对结肠癌 SW480 细胞 Wnt/β-Catenin 信号通路的作 用，提示奥曲肽对 Wnt/β-Catenin 信号通路的抑制作用与其增强 GSK-3β的活性 有关。 关键词 结肠癌，奥曲肽，Wnt，信号通路，GSK-3β。 Effects of the suppression of GSK-3β expression using Licl on OCT role of Wnt/β-Catenin pathways ABSTRACT Objectives We analyse that after the GSK-3β are repressed by the chlorination lithium, the changes of Somatostatin（SS） and their analogues octreotide（OCT） to the Wnt/β-Catenin signal pathway in colonic cancer SW480 cell, to further clarify GSK - 3βin Somatostatin inhibit Wnt/beta Catenin pathways in the role. This can afford the theoretical and experimental proof for candidate drugs which has broad exploiting prospect for research the Wnt signal pathway. M