桑树MaPGIP1基因克隆与表达分析-遗传学专业毕业论文.docxVIP

研究生优秀毕业论文 独创性声明本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 独创性声明 本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。论文中引用他人已经发表或出版过的研究成果，文中已加了特别标注。 对本研究及学位论文撰写曾做出贡献的老师、朋友、同仁在文中作了明确 说明并表示衷心感谢。 学位论文能王吐弘签字魄山f歹年i月胁 本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的规定， 有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被 查阅和借阅。本人授权西南大学研究生院(筹)可以将学位论文的全部或 部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手 段保存、汇编学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书，本论文：哜保密，口保密 期限至 年 月止)。 学雠文储始互眨仁锄鲐酗缘 签字日期：。驴侈年6月，i日 签字日期：0口，多年6月J瑚 、＼ 万方数据 目录中文摘要 目录 中文摘要 ． ■ Abstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． m 第一章文献综述 一 J 1．1植物真菌病害的研究进展 J 1．2植物抗病机制的研究 J 1．3 PGIP的研究进展 一 卫 1．3．1 PGIP的发现及分布 ．． ■ 1_3．2 PGIP的结构特点 ．． ■ 13．3 PGIP的功能以及作用机理 一 1．3．4 PGIP基因的表达模式 ■ 】．3．5 PGIP基因的表达调控 “ 1．3．6 PGIP在抗病育种中的应用 ■ 1．3．7 PGlP研究存在的问题与展望 矗 第二章引言 ． J 2．1研究背景及意义 J 2．2研究内容 J 2．2．1桑树MaPGIPl基因克隆与生物信息学分析 ．． J 2．2．2桑树MaPGIPl基因组织表达分析及对水杨酸的响应 J 2．2．3桑树MaPGIPl基因原核表达与功能分析 ．． J 2．3研究技术路线 加 第二章桑树MaPGIPl基因克隆与生物信息学分析 ． ¨ 3．1材料和试剂 ． ¨ 3．1．1试验材料、菌株及载体 ． ¨ 3．1．2主要试剂 ¨ 3．1_3主要培养基及缓冲液 ¨ 3．1．4实验仪器与设备 坦 3．2试验方法 他 3．2．1桑树MaPGIPI基因引物设计 ． 他 3．2．2 RNA的提取与检测 坦 3．2．3 RNA的纯化 ． B 3．2．4 cDNA第一链的合成 ． B 3．2．5桑树MaPGIPl基因的PCR扩增 H 万方数据 万方数据 万方数据 3．2．6PCR产物的回收、连接、转化与验证 3．2．6PCR产物的回收、连接、转化与验证 14 3．2．7桑树MaPGIPl基因的生物信息学分析 15 3．3结果与分析 ．16 3．3．1桑树MaPGIPl基因的克隆 ．16 3．3．2克隆片段的序列测定 16 3．3．3 MaPGIPI编码氨基酸序列的多重比对 ．．18 3．3．4 MaPGIPl分子进化关系分析 ．．18 3．3．5 MaPGIPl蛋白的生物信息学分析 19 3．4小结与讨论 ．22 第四章桑树MaPGIPl基因表达分析及对非生物诱导响应 23 4．1材料及试剂 ．23 4．1．1试验材料 一23 4．1．2主要试剂 一23 4．1．3主要仪器 ．．23 4．2试验方法 ．23 4．2．1桑树材料的处理 一23 4．2．2桑树各组织总RIgA的提取与纯化 ．24 4．2．3桑树总RNA反转录为eDNA ．24 4．2．4 MaPGIPl基因的定量PCR分析 ．．24 4．3结果与分析 ．25 4．3．1 MaPGIPl基因组织表达分析 ．．25 4．3．2 MaPGIPl基因在果实发育过程中的表达分析 ．．25 4．3．3水杨酸(SA)对MaPGIPl基冈表达的影响 26 4．3．4脱落酸(ABA)对MaPGIPl基因表达的影响 ．26 4．3．5机械损伤对埘护aPJ基因表达的影响 ．27 4．3．6低温(4℃)对MaPGIPl基因表达的影响 27 4．4小结与讨论 一28 第五章桑树MaPGIPl基因原核表达与功能分析 29 5．1材料和试剂 ．29 5．1．1试验材料、菌株及载体 ．．29 5．1．2主要试剂 29 5．1．3主要培养基 一29 5．1．4主要溶液 一30 5．1．5主要仪器与设备 一32 万方数据 万方数据 5-2试验方法 5-2试验方法 ．．33 5．2．1 MaPGlPl基因原核表达载体的构建 ．．33 5．2．2重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态 35 5．2．