利用控制硫甙合成基因的InDel标记筛选抗癌花椰菜新种质-设施栽培专业毕业论文.docxVIP

河南农业大学学位论文独创性声明、使用授权及知识产权归属承诺书学位论 河南农业大学学位论文独创性声明、使用授权及知识产权归属承诺书 学位论 利用控制硫甙合成基因的InDel标记筛 文题目 学位 选抗癌花椰菜新种质 级别 硕士 学生 学科 导师 王吉庆教授 李怡斐 设施栽培 姓名 专业 姓名 张晓伟研究员 学位论文 如需保密，解密时间 年月 日 是否保密 独创性声明 本人呈交论文是在导师指导下进行的研究工作及取得研究成果，除了文中 特别加以标注和致谢的地方外，文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成 果，也不包括为获得河南农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材 料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献 均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。 研究生签名：巷怡辈新躲导师签名：六乞币乞 只期：w-暑年‘月知午R 日期：Ⅺp3年占月砷日 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本人完全了解河南农业大学关于保存、使用学位论文的规定，即学生必须 按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印 刷本和电子版本，并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印、缩印或扫描等 复制手段保存、汇编学位论文。本人同意河南农业大学可以用不同方式在不同 媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。 本人完全了解《河南农业大学知识产权保护办法》的有关规定，在毕业离 丌河南农业大学后，就在校期间从事的科研工作发表的所有论文，第一署名单 位为河南农业大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河南农 业大学所有，否则，承担相应的法律责任。 研究生签名：磨稽裴 导师签名：2老予弋 学院领导签名：矽z 注：保密学位论文在解密后适用于本授权书。 人 l R期：加矿2年彳月砷日 日期：瑚8年‘月印 日期：晰厂月肖日 致谢致 致谢 致 谢 感谢恩师王吉庆教授，三年来在生活、学习方面给予我悉心的指导和帮助。 王老师敏捷的科研思维，严谨的治学态度和忘我的工作热情深深地影响着我。借 此机会，表示我崇高的敬意和衷心的感谢! 本试验是在导师张晓伟研究员的精心指导下完成的。张老师严谨求实的科研 态度、敏锐的思维方式、宽以待人的处事信条、忘我的工作态度使我终生受益， 是我学习的榜样。在此，谨向张老师表示我最崇高的敬意和最衷心的感谢! 感谢原玉香博士在试验实施过程中，给予了我无微不至的技术指导和帮助， 为本试验本论文倾注了大量的心血。在此，向原老师致以最崇高的谢意!感谢河 南省农科院园艺所的蒋武生老师、姚秋菊老师、耿建峰老师在试验过程中给予的 帮助。同时，在我三年的学习和生活中孙治强教授、孙守如副教授、李建吾副教 授、胡建斌博士、朱道圩教授、王兰菊副教授等也给予了很大的教导，在此向他 们表示最真挚的感谢。也感谢在河南省农科院中心实验室做试验期间易明林老 师、张强师兄、李晓慧师姐以及同实验室的李艺和王从彦对我实验上的帮助。 感谢同窗的齐卫强、程俊跃、卢继锋、于进步、阮云飞、穆瑞霞、张楠、王 贞、王建辉、季军、余东坡、杨子琴、张会丽等兄弟姐妹对我各方面工作的支持。 在此特别感谢齐卫强，在这三年来，他在各方面对我影响很大，是我的良师益友。 感谢卢继锋在我实验的紧急关头给予帮助。更加感谢师妹刘广霞，在试验整个过 程中给予帮助，使试验能够按时完成。同时感谢实习生陆魏巍、李沛然、师妹邢 燕、师弟菅广宇。就是在这样一个团结向上的集体伴随我渡过了愉快地3年美好 时光。 还要特别感谢我的家人三年来给予我的大力支持! 值此论文完成之际，谨向所有关心帮助过我的老师、同学和朋友致以最诚挚 的谢意! 李怡斐 2008年6月20日 文献综述摘 文献综述 摘 要 本试验以青花菜与花椰菜双单倍体纯系A5、A82的杂交后代与花椰菜连续回交3代的 199个群体为供试材料，利用所开发的标记对GSL-ALK和G．趾也DⅣ．G 2个基因进行检测。 主要试验结果如下： 1．开发了GSL-AL膳因的InDel标记ALK．InDel 在缺失区域对GSL-AL踺因设计引物，从引物组合中筛选出一个组合Odd2f／ALK．3的扩 增条带清晰且能分辨出缺失序列差别。测序确认扩增片段为该基因所特有，命名该标记为 ALK．InDel。并将该标记在青花菜和花椰菜小群体中进行验证。 2．开发了GSL-EL例忆甚因的InDel标记ELONG．InDel 在缺失区域对GSL-EL例忆毽因设计引物，从引物组合中筛选出2个组合扩增片段大小适 合，其中以P12f／Pllr组合扩增产物强且无非特异条带，初步确定P12f／P1lr为此试验中的引物 组合。在测序的基础上设计引物进行二次筛选，P1 l／P15组合扩增效果最好、没有非特异带 且扩增片段相对较小，容易检测出碱基的差异。对PCR产：物测序确认