毕业论文：EGF基因表达差异对小鼠早期胚胎发育的影响分析.docVIP

PAGE 2 l 河南农业大学 本科生毕业论文（设计） ? ? 题 目 EGF基因表达差异对小鼠 早期胚胎发育的影响分析 学 院 牧医工程学院 专业班级 生物工程专业2013届1班 学生姓名 指导教师 （教授） 撰写日期： 2013年 5 月 3 日 EGF基因表达差异对小鼠早期胚胎发育的 影响分析 （2013届生物工程专业1班） 摘要：为了进一步证实EGF基因的差异表达对DDK小鼠早期胚胎发育的影响，应用试剂盒提取目的物质、凝胶电泳、反转录和实时定量PCR等技术方法，对EGF基因在实验组(DDK♀ x BALB/C♂交配组合）和对照组(BALB/C♀ x BALB/C♂交配组合）中2细胞、4细胞和8细胞三个时期的表达进行了研究。结果：EGF基因在两种交配组合的三个时期表达差异都极其显著，尤其是到了8细胞时期，基因的表达达到了极显著差异的水平。说明EGF基因表达水平的降低是引发早期胚胎致死的因素之一，为揭开卵子突变基因导致胚胎致死现象提供必要的素材。 关键词：DDK小鼠；EGF基因；反转录；实时定量PCR Analysis of Different Expression of the EGF in Mouse Early Embryonic Development Wang Hua (Class 1 of Bioengineering, Graduated in 2013) Abstract: The expression of the EGF in 2,4 and 8 cells period in the (DDK♀ x BALB/C♂) and (BALB/C♀ x BALB/C ♂) mating combinations is studied in order to further confirm the effect that the EGF gene on mouse embryo development stage , to perfect the theory of molecular regulation in the formation of mouse blastocyst process and to apply reverse transcription, gel electrophoresis, real-time-PCR and ect. Result: there is significant expression difference of the EGF between the two mating combinations of the three periods. The result confirms that EGF gene expression level is one of the early embryonic lethal factors and provide necessary material for uncovering the ovum mutant gene leads to embryonic lethality phenomena provide necessary material. Key words: DDK Mice；EGF；Reverse transcription；Real-time-PCR DDK近交系小鼠，是日本人从一种属于M. m. domesticus亚种起源的德国小鼠培育而成的，其携带有卵子突变基因(ovum mutant)，并表现出一种被称为“DDK综合症”(DDK syndrome)的奇特繁殖现象：如同品系内交配一样，DDK雄鼠能够使其它近交系雌鼠正常受孕。但是，当DDK雌鼠与其它近交系雄鼠交配时，F1受精卵在妊娠3～5日因胚泡形成障碍而死亡，使得DDK雌鼠几乎不孕[1-3]。基于交配试验结果的分析，日本学者若杉提出了解释这一现象的如下遗传假说[4]：（DDK♀ x其它品系♂）F1代胚胎死亡的原因，是由于卵子细胞质因子(cytoplasmic factor of eggs)与精子因子(sperm factor)的不亲和性造成的，而这些不亲性因子的产生均受到位于染色体同一位点上的一对等位基因控制。后来，这一假说得到了卵子细胞质移植和受精卵原核移植试验的证明[5-6]，DDK卵子细胞质因子作为一种RNA分子的存在也已被确认(改称为卵子细胞质物质)[7]。 几十年来，许多国家的学者围绕着DDK小鼠极性不孕现象，从繁殖学、胚胎学及遗传学等多个方面，开展了大量的科学试