三叶草的细胞学、分子标记及多倍体诱导研究-特种植物育种与栽培专业论文.docxVIP

华中农业大学学位论文独创性声明及使用：IYllIlllI 华中农业大学学位论文独创性声明及使用：IYllIlllI J18llJrllllJ JIl2Jll4lrllt8jirflrofrul 学位论文 是否保密 易 如需保密，解密时间 7 ol／o年∥月1日 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究Z_-作及取得的研究成 果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书 而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任 何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。 研究生签名：‰‰ 帆炒7年占月占a日 学位论文使用授权书 本人完全了解“华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定”，即学生必须按 照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷版和电 子版，并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇 编学位论文。本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论 文的全部或部分内容。 注：保密学位论文在解密后适用于本授权书。 学位论文作者签名：耄鼎 导师签名： 叫锨幽 签名日期：歹沙7年‘月二a日 签名日期：九哆年f月2 z日 注：请将本表直接装订在学位论文的扉页和目录之间 目录摘 目录 摘 要 ．1 Abstract ．．：； 第一章文献综述 5 1三叶草的研究进展 ．．5 1．1三叶草研究现状 。5 1．1．1三叶草生物学特性 ．5 1．1．2地理分布 ．6 1．1．3利用价值 ．6 1．1．4三叶草的遗传改良 ．7 1．2三叶草种质资源的研究进展 8 1．2．1三叶草的形态与细胞学分类研究 9 1．2．2三叶草的分子标记及亲缘关系研究 一9 1．3主要分子标记原理及其应用 lO 1．3．1 RAPD l 0 1．3．2 RFLP 10 1．3．3 SSR 11 1．3．4 SRAP ．1 1 2白三叶草中B染色体的细胞学研究 12 2．1 B染色体 ．1 2 2．2 B染色体的特性以及研究进展 13 2．2．1形状和大小 l 3 2．2．2结构的多态性 13 2．2．3染色质 13 2．2．4基因序列 13 2．2．5在体细胞中的稳定性 13 2．2．6减数分裂中行为 13 2．2．7传递方式 l 4 2．2．8对植物性状的影响 14 2．2．9 B染色体的起源与功能 14 2．2．1 0植物中分布 ．．1 5 2．3有丝分裂和减数分裂中的B染色体 15 3巴东红三叶草多倍体诱导方法的研究 16 3．1多倍体概念和特-陛 l 6 3．1．1多倍体概念 ．1 6 3．1．2多倍体特。陛 ．1 6 3．2多倍体的形成途径 17 3．2．1多倍体自然发生 1 7 3．2．2人工诱变多倍体 1 7 3．3多倍体的鉴定方法 20 3．3．1形态鉴定法 ．20 3．3．2细胞学直接鉴定 2 1 3．3．3分子水平鉴定 ．．． 2l 3．4药用植物染色体加倍研究进展 3．4药用植物染色体加倍研究进展 22 4研究目的和意义 22 第二章三叶草的细胞学研究 ．24 1材料和方法 24 1．1材料 ．24 1．2方法 ．25 1．2．1．染色体标本的制作 ．25 1．2．2染色体核型分析 27 1．2．3数据处理及分析 27 2结果与分析 27 2．1染色体制片 27 2．1．1材料培养方法对制片的影响 。27 2．1．2取材时间对中期分裂相数目的影响 28 2．1．3根尖长度对中期分裂相的影响 28 2．1．4不同的前处理液对根尖细胞染色体的影响 28 2．1．5不同的固定液对制片的影响 29 2．1．6不同的酸解时间对制片的影响 29 2．1．7不同的酶解时间对制片的影响 29 2．2染色体的组型分析 30 3讨论 ．38 3．1细胞学研究 38 3．2关于染色体分析中相关软件的应用 39 第三章 三叶草的SRAP分子标记研究 ．40 1．材料与方法 ．．40 1．1材料 ．40 1．1．1总DNA的提取 40 1．1．2 PCR扩增体系与程序 4l 1．1．3数据分析 42 2结果与分析 ．42 2．1分子标记的多态性 42 2．2遗传相似性 42 3讨论 ．43 第四章白兰叶草中B染色体的细胞遗传学研究 ．46 1材料和方法 46 1．1材料 46 1．2方法 46 1．2．1体细胞 ．．46 1．2．2花粉母细胞 46 1．2．3育性 46 2结果与分析 46 2．1 B染色体在体细胞中的数目及对A染色体的形态和行为的影响 ．46 2．1．