雷公藤红素对CIA小鼠骨髓微环境中RANKL表达的影响研究-中医内科学（中西医结合风湿免疫学）专业毕业论文.docxVIP

研究生优秀毕业论文 目 目 录 中英文缩略对照表 1 中文摘要 3 Abstract ．．．．．． ．．．．．．．．．．．． ．．．．． ．．．． ．．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．． ．．．．．． ．．．．．．．．5 前言 7 第一部分RANKL在CIA模型小鼠中不同时期骨髓微环境的变化 一10 1．材料 ．10 2．实验方法 1 1 3．实验结果 14 讨 论 一23 结{仑 26 参考文献 一26 第二部分雷公藤红素对RANKL在CIA模型小鼠中不同时期骨髓微环境的影 响 28 1．材料 ．28 2．实验方法 30 3．实验结果 32 讨{念 40 结 论 4l 参考文献 ．．42 综述 43 致谢 ．71 万方数据 南京医科大学硕士学位论文雷公藤红素对C 南京医科大学硕士学位论文 雷公藤红素对C I A小鼠骨髓微环境中RANKL表达的影响研究 中英文缩略对照表 万方数据 南京医科大学硕士学位论文2 南京医科大学硕士学位论文 2 万方数据 南京医科大学硕士学位论文中文摘要 南京医科大学硕士学位论文 中文摘要 实验目的： 探讨雷公藤红素对胶原诱导关节炎模型鼠(Collagen-induced arthritis，CIA) 中核因子一K b受体活化因子配体(Receptor Activator for Nuclear Factor-1(B Ligand，RANKL)在骨髓微环境的变化影响。 实验方法： 建立胶原诱导关节炎(CIA)小鼠模型，观察高、中、低不同浓度Cel对 CIA小鼠的治疗作用及RANKL在骨髓微环境的影响。主要包括：1．通过构建 CIA小鼠模型，观察CIA小鼠发病过程：通过流式细胞术检测正常期小鼠及CIA 小鼠未发病期、发病前期、病情高峰期、病情缓解期骨髓微环境变化；通过提 取正常期小鼠及CIA组小鼠未发病期、发病前期、病情高峰期、病情缓解期骨 髓，加入不同浓度RANKL进行原代骨髓破骨细胞诱导，探究不同时期CIA小 鼠在不同时期骨髓向破骨细胞分化能力的改变：2．通过小鼠关节炎评分，观察 CIA组及高、中、低CIA+Cel组小鼠发病情况；通过流式细胞术检测CIA组及 高、中、低CIA+Cel组小鼠骨髓微环境中的变化；通过提取CIA组小鼠及高、 中、低CIA+Cel组骨髓，加入不同浓度RANKL进行原代骨髓破骨细胞诱导， 探究Cel对CIA小鼠骨髓破骨细胞分化影响。 实验结果： CIA小鼠于一次免疫后28天开始陆续出现关节红肿，直至一次免疫后35 天达到高峰，病情高峰期约维持3—7天，此后关节红肿陆续消退，直至一次免 疫后60天C／A小鼠无明显关节红肿；骨髓流式细胞术结果表明，RANKL在发 病前期在骨髓淋巴细胞群、T细胞、B细胞、单核细胞表达比例达到最高，在 病情高峰期及病情缓解期出现下降，在病情缓解期时，RANKL在浆细胞中比 万方数据 南京医科大学硕士学位论文例上升；破骨细胞诱导结果表示，CIA模型鼠骨髓细胞在发病前期、病情高峰 南京医科大学硕士学位论文 例上升；破骨细胞诱导结果表示，CIA模型鼠骨髓细胞在发病前期、病情高峰 期、病情缓解期时可以在较低浓度RANKL条件下向破骨细胞分化。动物模型 关节炎评分显示，高、中、低CIA+Cel组小鼠关节炎评分均低于CIA组；与 CIA组相比，不同浓度Cel能均能降低RANKL在骨髓淋巴细胞、B细胞、T 细胞中的表达。在CIA+Cel中剂量、高剂量组小鼠骨髓中，RANKL在单核细 胞的比例降低。CIA+Cel低剂量、中剂量组对RANKL在骨髓浆细胞中表达作 用较小，但Cel高剂量组可以增加RANKL在骨髓粒细胞中的表达。 实验结论： 1．在CIA小鼠发病过程中，骨髓微环境改变的发生早于病情改变。RANKL 主要在CIA小鼠骨髓淋巴群、T细胞、B细胞中比例明显升高，暗示了类风湿 关节炎骨髓微环境的改变早于关节外表现。 2．Cel能够在CIA小鼠发病前期降低RANKL在CIA小鼠骨髓淋巴细胞群、 T细胞、B细胞中的表达，降低破骨细胞分化水平，改变骨髓微环境，缓解骨 侵蚀，降低病情活动度，为治疗类风湿关节炎提供了新的思路。 关键字：类风湿关节炎，雷公藤红素，骨髓，核因子一K b受体活化因子配体 4 万方数据 南京医科大学硕士学位论文Abstract 南京医科大学硕士学位论文 Abstract objective：to develop the effects of Celastrol on RANKL in bone marrow microenvironment of CIA mouse methods：CIA mouse model was established to o