矿质元素对丹参次生代谢物积累的影响与调控-生态学专业毕业论文.docxVIP

研究生优秀毕业论文 浙江理工大学学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 浙江理工大学学位论文独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论 文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得 浙江理工大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我 一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的 说明并表示谢意。 学位论文作者签名： 锄宇张芋 签字目期： 为J岁年莎月8日 万方数据 学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解逝江堡王太堂有权保留并向国家有关 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解逝江堡王太堂有权保留并向国家有关 部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。 本人授权逝鎏堡三太堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关 数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保 存、汇编学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名：张宁 签字曰期： Ⅻ垮年多月8目 导师签名：≥挈‘仇／乡 D 签字曰期： 乃修年6月8日 万方数据 项目资助本研究受“国家自然科学基金”(8 项目资助 本研究受“国家自然科学基金”(8 1373908)“MYB转 录因子对丹参酚酸类成分合成的调控作用及其机理研究的 资助。 万方数据 摘要丹参，为唇形科植物丹参(Salvia 摘要 丹参，为唇形科植物丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)的干燥根及根茎，是我国的传统中 药和大宗药材之一。丹参对心脑血管疾病的治疗和抗氧化等方面疗效显著，同时丹参的药 理活性成分已经基本清楚，其活性成分可以分为水溶性的迷迭香酸、丹酚酸、原儿茶醛和 丹参素等，以及脂溶性的二萜醌类化合物丹参酮类和对醌型的罗列酮类。 添加诱导子被认为是能够有效提高药用植物次生代谢产物合成最有效的方法之一。本 文以紫花丹参毛状根为实验材料，通过组织培养的方法，筛选不同种类的诱导物来获得可 以促进丹参毛状根中有效成分积累的诱导子。选用的诱导子包括重金属类的镍元素，植物 生长必需元素磷和有益元素硒，稀土元素铈和钕。在确定可以促进诱导丹参有效成分积累 的诱导物后，进一步利用该诱导子对丹参毛状根进行时间梯度的诱导实验，测定丹参有效 成分合成途径中各关键酶基因的表达以及保护酶的活性，探讨诱导子对丹参有效成分合成 的调控机制，并对低磷诱导条件下的响应基因SmSPX进行生物信息学分析。 本实验主要研究结果如下： 1．不同诱导子对丹参毛状根次生代谢物含量的影响：丹参毛状根在10 gM NiS04的诱 导下，丹参酮II A，隐丹参酮，二氢丹参酮I和丹参酮I的合成均受到促进；上述4种丹 参酮的合成量在0．1，0．5，1 mM Na2Se03的诱导处理时提高；100 gM的Nd(N03)3诱导处 理可以促进丹参脂溶性成分的合成；50 gM的Cem03)3处理可以显著促进二氢丹参酮I和 隐丹参酮的合成；在培养基中磷浓度为对照组的1％(0．0124 mmoi／L)胁迫处理下，迷迭 香酸、丹酚酸B、丹参素、咖啡酸和阿魏酸，以及上述4种丹参酮的合成均受到促进。 2．以50 gM的Ce叫03)3为诱导条件对丹参毛状根进行时间梯度的诱导培养，可以得出： 相对于对照组，50 gM的Ce㈣03)3可以有效促进丹参毛状根中二氢丹参酮I和隐丹参酮的 积累，通过对丹参酮合成途径上关键基因表达的分析，推N---氢丹参酮I和隐丹参酮的合 成可能与丹参酮lI A和丹参酮I不在同一条代谢途径。此外，50 1aM Ce3+的诱导可以提高 POD活性，然而对SOD的活性没有显著影响。 3．以培养基中磷浓度为对照组的1％(O．0124 mn的l／L)作为诱导条件对丹参毛状根进 行时间梯度的诱导培养，可以得出：低磷会阻碍毛状根干物质的积累，抑制毛状根的生长， 并推测在低磷条件下毛状根干物质的积累是一个较长期的过程。在诱导期间(15．27天)， 对照组1％浓度的磷处理可以有效促进水溶性成分迷迭香酸、丹酚酸B、丹参素、咖啡酸 和阿魏酸的积累，同时也可以促进脂溶性成分丹参酮II A，隐丹参酮，二氢丹参酮I和丹 万方数据 参酮T的积累。1％低磷诱导会明显提高POD的活性。 参酮T的积累。1％低磷诱导会明显提高POD的活性。 4．丹参转录组的比对，得出丹参中只含有SPX结构域SPX的家族基因SmSPXl，SmSPX2， SmSPX3和SmSPX4的序列，利用在线软件SOPMA对上述基因在一级序列基础上进行二 级结构预测得出了4种基因的结构信息。 关键词：丹参；诱导子；酚酸类化合物；丹参酮；表达分析； 万方数据 AbstractDansh