实验十一 饮料的微生物学检查.pptVIP

实验十一 牛乳和饮料中卫生细菌学检查 实验目的 1. 掌握牛乳和饮料的细菌学检查方法 2.???学习牛乳的巴斯德消毒法 实验原理 牛乳和饮料中营养丰富，pH多为中性，属于较为温和的条件，适合于大多数细菌生长，容易被细菌污染，影响人体的健康，因此其卫生细菌学检查是食品安全检查的重要内容。牛乳的细菌学检查方法通常有三种：1) 显微镜直接计数法 2)美兰还原酶实验法 3）标准平板计数法，其中方法3)最灵敏，应用最为广泛。我国消毒牛乳的卫生标准是细菌总数30000个/毫升。 具体平板计数原则参考P183 。 菌落计数方法 （1）计算相同稀释度的平均菌落数有较大片菌苔生长时，弃用；以无片菌苔生长的平皿计数。若片菌苔大小不到培养皿的一半，其余一半分布均匀，将此一半计数×2（2）选择平均菌落数在30～300之间的平板只有一个符合此范围时，以该平均菌落数乘稀释倍数。有两个在30～300间时，按两者菌落总数比值决定：比值小于2，取平均；比值大于2，取较小的菌落总数。（3）所有菌落数均大于300，取稀释度最高的平均菌落数乘稀释倍数。（4） 所有菌落数均小于30，取稀释度最低的平均菌落数乘稀释倍数。（5） 所有菌落数均不在30～300之间，以最接近30或300的平均菌落数乘稀释倍数。 实验材料 1. 牛乳、饮料 2. 牛肉膏蛋白胨培养基、灭菌移液管、灭菌平皿等 实验内容 1. 生牛乳的巴斯德消毒（1、3、5、7组） 取生牛乳5ml装入灭菌试管内，放入78℃水浴锅内10min,水面高于牛乳液面，并经常摇动试管，到10min后取出试管，流水冷却后即为巴斯德消毒乳。 2. 生牛乳的细菌总数检查（ 6皿/组） 2、4、6、8组） 取生牛乳0.5ml加入4.5ml无菌水的试管中（10-1），然后系列稀释至10-7，取10-5 、10-6、10-7稀释度1毫升做平板倾注，37℃培养24h，计数。 3. 巴斯德消毒乳的细菌总数检查（6皿/组） 取巴斯德消毒乳0.5ml加入4.5ml无菌水的试管中，然后系列稀释至10-5，取10-3、10-4、10-5稀释度1毫升做平板倾注（或涂布），37℃培养24h，计数。 4. 饮料中的细菌总数检查（2皿/组） 直接取饮料1ml 做平板倾注（或涂布），37℃培养24h，计数。 实验结果 1. 计算生牛乳中细菌总数 2. 计算巴氏杀毒奶的细菌总数 3. 计算饮料中细菌总数 实验考试 实验技能考试（30分） 15周随堂内容： 1）移液管、 试管、三角瓶包扎 2 试管分装（3）倒平板（4）接种（平板接液体管） 实验理论考试（总分30分）时间：15周周六上午9:00 1. 客观题（填空、判断、选择），每题1分 2. 内容: 实验原理、关键步骤及培养条件，课后习题不考。 平时成绩（10分）。 实验报告（总分30分） 上次实验习题解答 1. 含化学消毒剂的滤纸片周围形成的抑(杀)菌圈表明该区域培养基中的原有细菌被杀死或被抑制而不能进行生长，你如何用实验证明抑(杀)菌圈的形成是由于化学消毒剂的抑菌作用还是杀菌作用? P103，2（1） 在培养基表面揭去滤纸片后继续培养，24~48h后观察结果。如果在抑(杀)菌圈里有细菌生长，说明该化学消毒剂的效果是抑菌作用，否则为杀菌作用。 *