磷脂酰胆碱的提取、纯化和分析研究-营养与食品卫生学专业论文.docxVIP

数、提取温度、提取压力及夹带剂用量对PC提取的影响，结果显示，随着提取温 数、提取温度、提取压力及夹带剂用量对PC提取的影响，结果显示，随着提取温 度、提取次数、夹带剂用量的增加，PC得率增加，提取压力增加时，PC得率先 增加后下降；随着提取次数、夹带剂用量的增加，PC纯度先增加后减少，提取温 度的增加使PC纯度呈下降趋势，但提取压力增加时，PC纯度先下降后增加。通 过初步考察，超临界法萃取PC还待进一步研究。 3．采用柱层析法纯化PC。以Pharmadex LH一20为填料，进行柱层析可以纯化 PC，得到比较理想的产品，经HPLC分析归一化后纯度至少在97％以上，洗脱使用 单一试剂乙醇或者甲醇，洗脱时间短，洗脱剂用量约为180 mL，并可回收反复使 用，处理样大，产品浓度高。 4．建立了分光光度法测定卵磷脂含量的方法，采用硝酸一高氯酸一双氧水消解方 法，安全，简便，易行；使用定磷试剂(18％硫酸溶液：2．5％钼酸铵溶液：水：10％抗 坏血酸=1：l：2：1)显色，实验结果可靠，重现性好，回收率在95-105％之间；整个 操作简单，方便，适于简陋条件的快速测定。 5．建立了HPLC法测定PC含量的方法，色谱条件为：色谱柱为g-Porasil(300 mm×4．6 Him，5岬)；流动相为乙腈：甲醇：85％磷酸=7：1：0．08；检测波长为205 nm； 进样量为20乩；流速为0．8 mL／min，方法快速，准确，重现性和稳定性结果满 意，加样回收率在95％．100％之间。 6．摸索了TLC法测定PC的的方法，最佳条件为：展开剂为氯仿：甲醇：冰乙酸 =24：18：0．04，磷钼酸乙醇液喷雾显色。 7．对柱纯化样，采用多种手段进行纯度分析和光谱分析，并通过GC-MS测定 样品的脂肪酸侧链种类，结合MS谱图，研究了PC可能的分子组成。 采用HPLC法测定其PC含量为99．05％；在薄层板上展开，显色后为单个斑点， Rf值与对照品PC相仿；其紫外光谱图最大吸收波长为202 nm，与文献报道相符； 红外光谱图的结构分析也证实纯化物有C=O、N—C、P—O．C等结构；柱纯化样和 SIGMA公司PC标准品的MS谱图相似；因此可以认为分离出来的样品为纯品，且为 PC。 通过Gc—MS分析样品的脂肪酸侧链种类，结果显示含有肉豆蔻酸、棕榈酸、 亚油酸、亚麻酸、硬脂酸，其中棕榈酸、亚油酸、硬脂酸占很大比例。分析纯化 样的MS谱图，并结合脂肪酸测定结果，纯化样中主要含有的PC种类可能是亚油 2 酸一棕榈酸一磷脂酰胆碱、二亚油酰一磷脂酰胆碱、二油酰．磷脂酰胆碱、二硬脂酰～磷脂酰胆碱。 酸一棕榈酸一磷脂酰胆碱、二亚油酰一磷脂酰胆碱、二油酰．磷脂酰胆碱、二硬脂酰～ 磷脂酰胆碱。 关键词：磷脂酰胆碱：卵磷脂；乙醇冷冻提取法；超临界C02提取法；分光光度 法；高效液相色谱法；薄层层析法；Pharmadex LH一20 AbstractPhosphatidylcholine(PC)is Abstract Phosphatidylcholine(PC)is commonly considered as one of the most important lecithin in biological activities and has main function in nutrition a11d health． Phosphatidylcholine，which is composed of fatty acid，choline，glyceryl and phosphoryl group，provides phosphorus for body growing，and is the main source of choline aIld essential fatty acid，thereinto，choline is essential to the growth of man’s cerebra and keeps it work naturally；it has good emulsification as a typical compound bearing hydrophile and oleophile，for the existence of fatty acid and phosphoryl group．Therefor， phosphatidy7lcholine has many functions in medical use，such as improving the activity of cells in man’s cerebra，building up memory,keeping young，defending aged d