联会复合体中央组分蛋白的结构和功能研究-生物化学与分子生物学专业论文.docx

万方数据 万方数据 非公开论文编号 备注 注：本授权书适用我校授予的所有博士、硕士的学位论文。由作者填写一份并签字后交校图书馆，如已批准为非公开学 位论文，须附批准通过的《南开大学研究生申请非公开学位论文审批表》和“非公开学位论文标注说明”页。 南开大学学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师指导下进行研究工作所 取得的研究成果。除文中已经注明引用的内容外，本学位论文的研究成果不包 含任何他人创作的、已公开发表或者没有公开发表的作品的内容。对本论文所 涉及的研究工作做出贡献的其他个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本 学位论文原创性声明的法律责任由本人承担。 学位论文作者签名： 年 月 日 非公开学位论文标注说明 (本页表中填写内容须打印) 根据南开大学有关规定，非公开学位论文须经指导教师同意、作者本人申 请和相关部门批准方能标注。未经批准的均为公开学位论文，公开学位论文本 说明为空白。 论文题目 申请密级 □限制(≤2 年) □秘密(≤10 年) □机密(≤20 年) 保密期限 20 年 月 日至 20 年 月 日 审批表编号 批准日期 20 年 月 日 南开大学学位评定委员会办公室盖章(有效) 注：限制★2 年(可少于 2 年);秘密★10 年(可少于 10 年);机密★20 年(可少于 20 年) 摘要 摘要 摘要 真核生物进行有性生殖的基础是细胞的减数分裂，即细胞经过一次染色体 复制和两次分裂后形成单倍体细胞。减数分裂的关键步骤是联会复合体结构的 形成，联会复合体由三部分组成，分别是沿着每一条染色体形成的侧向组分， 相互靠近排列成梯子状的中央区域，以及连接二者的横向纤维。 联会复合体的正确组装可以保证来自亲代的两条染色体平均分配到两个子 细胞中，同源染色体的联会失败会导致严重的后果，如形成异倍体细胞甚至不 孕等，人类卵母细胞非整倍性已被普遍认为是造成妊娠中止的重要原因。 目前，在哺乳动细胞中有七种形成联会复合体的蛋白组分被鉴定出来，它 们分别是横向纤维组分 SYCP1，侧向组分 SYCP2 和 SYCP3，中央组分 SYCE1， SYCE2，SYCE3 和 TEX12。这些蛋白都是在减数分裂进程中选择性表达，都是 主要由 α-螺旋构成，在进化上都具有较高的保守性，目前的研究都是建立在对 基因敲除小鼠模型上初步摸索联会复合体组装机制。 本文对联会复合体的中央区域的组成蛋白进行了研究，利用 X 射线晶体学 的方法解析了 SYCE3 蛋白分辨率为 1.9 ? 的晶体结构，发现其自身的二聚现象 在体外和细胞内都稳定存在，并利用生物化学和细胞生物学等手段研究了 SYCE3 和 SYCE1 的相互作用。本文还对中央区域中其他蛋白有可能形成的复合 物进行了研究，实验中发现 SYCE1/SYCE3/SYCP1 这三个蛋白之间虽然有相互 作用，但在溶液中很难形成稳定的复合物；此外，本文利用多种方法得到了 SYCE2/TEX12 的稳定复合物，并进行了结晶尝试，获得了可以衍射的晶体。 对于联会复合体蛋白结构和功能的研究，有助于更深刻的理解在减数分裂 过程中染色体的联会行为，也为今后相关的生殖疾病开发出基因治疗等方法提 供了理论基础。 关键词：减数分裂，联会复合体，中央组分蛋白，SYCE3，SYCE2/TEX12 I Abstract Abstract Abstract Sexual reproduction occurs in eukaryotes through meiosis, a process by which a diploid germ-line cell divides, resulting in the formation of haploid cells. This process involves one round of DNA replication and two rounds of cell division. Errors during meiosis can lead to disorders that result from an abnormal number of chromosomes. Prior to the first division, the key step of meiosis is that two homologous chromosomes pair and that a synaptonemal complex (SC) develops between them. Once synapsis is complete, the homologous chromosomes undergo recombination. The synaptonem