商陆皂苷甲对自身免疫性小鼠及其分子机制的研究-药理学专业论文.docxVIP

ABBREVIAn0NEsA ABBREVIAn0N EsA esculentoside A SLE Systemic lupus crythematosus RA Rheumatoid arthriris ds．DNA double strand DNA ICAM一1 intercellular adhesion molecule．1 HUVEC304 Human umbilical vein endothelial celj 304 ConA Concanavalin A LPS Lipopolysaccharide RT．PCR Retrotranscription polymerase chain reaction PlN Protein inhibitor of nitric oxide synthase TGF—B transforming growth factor-p AP．1 activator protein一1 PIASl protein inhibitor ofactivated STAT 1 GSl(3 beta glycogen synthase kinase 3 beta Shh sonic hedgehog AICD activated induccd ccll death edc cell division cycle kinase Rb Refinoblastma No Nitric Oxide IL Interlellkjn 2 摘 摘 要 商陆皂苷甲(esculentoside A，EsA)是中药商陆皂苷中含量最高的组分。近二 十多年的研究表明EsA具有广泛的药理作用。本研究考察了EsA对自身免疫性 模型小鼠的作用，并从抗炎机制和免疫调节机制的角度阐述了其作用机理，此 外还利用基因芯片技术研究了EsA对小鼠胸腺细胞表达谱的影响，旨在从整体 动物、细胞水平及分子水平上系统地阐明其作用机理。 f自身免疫小鼠模型通过CJ--S。菌株辅以佐剂免疫而建立。EsA作用于模 型小鼠后，发现EsA能够剂量依赖性地降低模型小鼠高水平的抗ds．DNA抗体 及抑制T、B细胞的过度增殖。无论在有丝分裂原(ConA，LPS)存在或不存在的 情况下，模型小鼠淋巴细胞增殖水平与正常小鼠相比都有大幅度的上升。在没 有有丝分裂原刺激时，EsA在5、10、20mg／kg剂量下对模型小鼠的淋巴细胞增 殖的抑制率分别为26％，33％，42％(P0．01)。在ConA刺激的情况下，中剂量的 EsA将模型小鼠的淋巴细胞的异常增殖水平降至正常水平附近。而在LPS刺激 的情况下，经20mg／kg EsA处理后，小鼠的淋巴细胞的增殖水平降至正常水平： 抗双链DNA抗体在模型小鼠血清中的含量比正常小鼠血清中的含量有显著的 增高fJp0．01)。EsA能剂量依赖性地抑制模型小鼠的增高的抗双链DNA抗体水 平。在20mg／kg EsA的治疗下，模型小鼠的增高的抗双链DNA抗体水平与正 常水平接近。 内脏的病理切片表明EsA能改善肝、肾等内脏器官的炎症；骨关节病理切 片表Ⅲj EsA能够改善模型小鼠出现的类风湿性关节炎的三联征。另外模型小鼠 的足肿情况也得到了较好的改善。说明EsA对自身免疫性小鼠模型确有疗效。 模型小鼠肝脏肝细胞肿胀变性明显，有大量淋巴细胞多灶性浸润。经EsA治，， 后，町见肝细胞变性不明显，灶性坏死部分吸收，散在炎症细胞浸润减少。模 型小鼠肾小球体积明显增大，肾小球内炎症细胞明显增多，间质充血、出血叫 显，人量淋巴细胞浸润。经EsA治疗后，淋巴细胞浸润显著减少。随着剂量的 增火，肾小球体积有所减小，炎症明显缓解。模型小鼠的骨关节病理切片显示： 滑膜组织增生，滑膜下新生血管数量增多。血管通透性高，周围可见灶性炎症 细胞渗出。血管翳向软骨表面侵蚀性生长，软骨明显受到侵蚀和破坏。随着EsA 剂量的增大，关节炎症逐步得到了改善。滑膜组织增生减轻，血管翳减少，软 骨破坏减少。20mg／kg EsA治疗后，血管翳儿乎消失，可见光滑平整的软骨面。 模型小鼠与正常小鼠相比，双侧后肢均有严重的删t胀。而且，左侧足跖(注射侧) 比右侧足跖的肿胀程度高。EsA三个剂量组的小鼠后肢的肿胀程度在整个治疗 过船!中均比模型小鼠低。模型小鼠的体重与正常小鼠相比无显著性差异。EsA作用下，模型小鼠的体重也未有明显变化J 过船!中均比模型小鼠低。模型小鼠的体重与正常小鼠相比无显著性差异。EsA 作用下，模型小鼠的体重也未有明显变化J 7 为了探讨EsA对自身免疫性疾病的可能的药理作用机制，分别从抗炎和免 疫调节两个角度进行了研究。(EsA能显著降低HUVEC304细胞对中性粒细胞的 粘附，抑制ICAM—l mRNA及蛋白的表达，降低中性粒细胞CDl 8 m