两个常染色体隐性视网膜色素变性合并白内障家系的致病基因突变分析-遗传学专业论文.docxVIP

两个常染色体隐性视网膜色素变性合并白内障家系的致病基因突变分析-遗传学专业论文.docx

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独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。尽我所知,除文中已经标明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或 集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体,均已在 文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名: 日期: 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权 保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。 本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检 索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本论文属于 保密□, 在 年解密后适用本授权书。 不保密□。 (请在以上方框内打“√”) 学位论文作者签名: 指导教师签名: 日期: 年 月 日 日期: 年 月 日 华 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 I I 摘 要 视网膜色素变性(Retinitis Pigmentosa,RP)是一种常见的遗传性视网膜功能退 行性疾病,全球发病率为 1:3000-5000。RP 典型临床症状为夜盲、进行性视野缺损和 视力下降,可伴发斜视、屈光不正、眼球震颤和白内障等,其中白内障发生率高于 40%。本研究收集了两个常染色体隐性视网膜色素变性合并白内障家系,通过连锁分 析、候选基因测序及外显子组测序等方法鉴定了这两个家系的致病基因及突变,并 对其分子致病机理进行了初步探讨,结果如下: 家系 1 三位患者分别来自两个换亲家庭,眼底检查发现其视网膜有骨针样色素 沉积、血管变细、视盘苍白和不同程度的黄斑萎缩,且双眼并发后囊下白内障,呈 放射状。以微卫星标记对家系 1 已知常染色体隐性 RP 致病基因进行了连锁分析,将 其致病基因定位于 14 号染色体微卫星标记 D14S163 和 D14S1050 之间。该区间内有 两个已知常染色体隐性 RP 致病基因 RDH12 和 SPATA7,对先证者基因组 DNA 直接 测序发现 RDH12 复合杂合突变(c.184CT/p.R62X 和 c.437TA/p.V146D)和 SPATA7 杂合改变 c.995TC/p.I332T。RFLP 分析证实 RDH12 复合杂合突变在家系内与疾病 共分离,而且在家系外 100 个正常人中未检测到这两个突变。保守性分析发现 RDH12 第 62 位 精 氨酸 和 146 位 缬 氨酸 从 斑 马 鱼 到人 类 高 度 保 守。 RDH12 c.184CT 和 c.437TA 为已报道突变,说明这两个突变对疾病均有贡献。因此推测 RDH12 基因 复合杂合突变 c.184CT/p.R62X,c.437TA/p.V146D 可能为家系 1 患者致病的遗传 基础。该家系三位患者均携带 SPATA7 杂合改变 c.995TC/p.I332T,它是否会影响患 者的临床表型有待于进一步分析。全球有 11.8%的 RP 患者携带 RDH12 突变,其中 白内障并发率大于 40%,但该基因突变在中国 RP 人群中较为罕见。结合本研究结果, 目前仅在 6 个汉族 RP 家系和 8 例汉族散发患者中发现 RDH12 突变,占中国 RP 患 者的 4.6%,其中并发白内障为 30%。进一步统计发现在 20 例汉族 RDH12 突变患者 中,12 例均携带 c.437TA 突变,说明该位点在汉族 RP 患者中是一个突变热点。 家系 2 三位患者来自一近亲结婚家庭,眼底检查可见视网膜骨针样和团块状色 II II 素沉积,脉络膜严重萎缩,双眼合并粉尘状后囊下白内障,其中先证者和一位患者 眼底视网膜不见结晶样沉积,另一患者视网膜则可见少量结晶样沉积。外显子组测 序发现先证者和一位患者均携带 CYP4V2 基因的纯合突变 c.1198CT,进一步测序发 现该纯合突变与家系 2 疾病共分离。CYP4V2 c.1198CT 突变导致 CYP42V 蛋白第 400 位高度保守的精氨酸变为半胱氨酸(p.R400C)。CYP4V2 c.1198CT/p.R400C 为已 报道突变,说明该突变 在疾病发生中起作 用。这些结果说明 CYP4V2 纯合 突变 c.1198CT/p.R400C 可能是家系 2 患者的致病原因。本研究进一步证实该基因突变引 起的疾病表型具有异质性,同时也为研究 BCD 患者 CYP4V2 基因的突变类型和突变 频率提供了数据资料。 关键词:视网膜色素变性;白内障;连锁分析;外显子组测序;RDH12 基因; SPATA7 基因;CYP4V2 基因 PAGE III PAGE III Abstract Retinitis pigmento

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