2020年高考生物一轮复习讲义：选修1 第十一单元 第40讲 微生物的培养与应用 .docVIP

第40讲　微生物的培养与应用 [考纲明细]　1.微生物的分离和培养　2.某种微生物数量的测定　3.培养基对微生物的选择作用　4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用 知识自主梳理 一、微生物的实验室培养 1．培养基 (1)概念：人们按照微生物对eq \o(□,\s\up3(01))营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的eq \o(□,\s\up3(02))营养基质。 (2)营养成分：水、eq \o(□,\s\up3(03))碳源、eq \o(□,\s\up3(04))氮源、无机盐四类营养物质，另外还需要满足微生物生长对eq \o(□,\s\up3(05))pH、特殊营养物质以及eq \o(□,\s\up3(06))氧气的要求。 (3)培养基的分类 ①按物理状态分类 ②按化学成分分类 ③按功能分类 [深入思考]　为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？ 提示　在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。 2．无菌技术 (1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止eq \o(□,\s\up3(17))杂菌污染的方法。 (2)关键：防止eq \o(□,\s\up3(18))外来杂菌的入侵。 (3)不同对象的无菌操作方法(连线) 答案　①、②、⑥—b—Ⅰ、Ⅱ　③、④、⑤—a—Ⅲ、Ⅳ 3．大肠杆菌的纯化培养 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 ①操作步骤 eq \x(计算)→eq \x(\o(□,\s\up3(19))称量)→eq \x(溶化)→eq \x(\o(□,\s\up3(20))灭菌)→eq \x(\o(□,\s\up3(21))倒平板) ②倒平板的方法及注意事项 a．请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：eq \o(□,\s\up3(22))丙→乙→甲→丁。 b．乙中的灭菌方法是eq \o(□,\s\up3(23))灼烧灭菌。 c．丁中的操作需要等待eq \o(□,\s\up3(24))平板冷却凝固才能进行。 [深入思考]　(1)倒平板操作为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 提示　通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 (2)平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 提示　平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 (2)纯化大肠杆菌的两种方法 1)平板划线法 ①概念：是通过eq \o(□,\s\up3(25))接种环在琼脂固体培养基表面eq \o(□,\s\up3(26))连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 ②注意事项： a. b．灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。 c．第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 d．划线时最后一区不要与第一区相连。 e．划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。 2)eq \o(□,\s\up3(27))稀释涂布平板法 ①概念：是将菌液进行一系列的eq \o(□,\s\up3(28))梯度稀释，然后将eq \o(□,\s\up3(29))不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 ②操作过程 (3)菌种的保存方法 ①对于频繁使用的菌种，可以采用eq \o(□,\s\up3(30))临时保藏的方法。 ②对于需要长期保存的菌种，可以采用eq \o(□,\s\up3(31))甘油管藏的方法。 二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1．筛选菌株 (1)自然界中目的菌株筛选的依据：根据它对eq \o(□,\s\up3(01))生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 (2)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于eq \o(□,\s\up3(02))目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时eq \o(□,\s\up3(03))抑制或阻止其他微生物生长。 (3)选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时eq \o(□,\s\up3(04))抑制或eq \o(□,\s\up3(05))阻止其他种类微生物生长的培养基。 2．统计菌落数目 (1)常用方法：eq \o(□,\s\up3(06))稀释涂布平板法。 (2)统计依据 当样品的eq \o(□,\s\up3(07))稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个eq \o(□,\s\up3(08))活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 (3)活菌计算方法：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M[其中C代表某一稀释度下平板