两个不同人工雌核发育草鱼群体基因组DNA的RAPD分析及金鱼vsx1基因结构分析-发育生物学专业论文.docxVIP

摘要 一.关于两个不阿人工雌核发育革鱼群体基因组 DNA 的 RAPD 分析: 果用随机扩增多态性 DNA (RAPD) 技术对连续两代人工诱导雌核 发育革鱼群体如一代人工诱导雌核发湾草鱼群体的群体内的遗传梧 似度、遗传距离以及群体多样性进行了分析，并用…个随机取样的普 通至在鱼群体作比较。其中的一个雌核发宵草鱼群体是经历了埠蝶两代 人工蝶核发育的极体-有丝甲雌核发育蔡鱼群体。另一个雄接发育革鱼 群体是通过一次人工雌核发育所获得的有丝-雕核发育革鱼群体。普 通革鱼群体随机取自长沙的农贸市场。 理 26 个多态性号!物在五个群体中共捡 a到了 291 个扩增位点: 在三个群体中检测到的位点数分别为 265 、272 和 282 其中多态性 位点数分别为 15、19 和 8 1.遗传学统计分析结果表明:三个群体的 多态位点出割分别为 5.66%、6.99%、28.72%; 香农表望多样性握数 分别为 0.1702 、0.3169 和 08450; 指照 Nei 指数统计的三个群体的 遗传相似度分别为 0.9851 、0.9820 、0.91140 这些结果表明:两个 雄核发育革鱼群体能遗传多样性运链子普适革鱼群体，需其群体的基 因组 DNA 同质性远高于普通革鱼。而在两个雌核发育革鱼群体中，两 代雌核发育群体的遗传多样性要低于…代雌核发宵群体的遗传多样 ?于:茹群体的遗传结合度黯前者高于后者。 一、金鱼 vsxl 基因基因组站构分析: vsxl 基因编码的蛋臼具有一个 paired-]ike 的问摞异型域和 CVC 壤，是与最需早揭发育梧关的重要基嚣，对提再黯前体摇摇的增蕴， 杆状和椎体双极细胞的特化、分化以及分化状态的维持具有重要作 耍。本研究以金鱼为材料，分离和克隆了金鱼的 vsxl 基因，分析了其 基嚣的结艳，确定了 vsxl 基嚣的藏基序究及其 5 端部分捧到，为 进一步深入研究 vsxl 基因的功能创造了条件。 根据己知的 vsxl 基因的 5 端部分序列，设计三个嵌王军式的基 出特异引辑 (GS料，与不羁的任意一个提草 L51辑组合作为 TAIL-PCR 反应的引物，提取金鱼尾蜡的基因组 DNA 用作聚合酶链式反应 (PCR) 的模损，使用 TAIL PCR 技术对金鱼基因组 DNA 进行扩增，得到了 3 个 TAIL-PCR 扩增产物。随后对这三个序列 CFa3 ，Fb3. 时3) 进行 PCR 产物直接撤序或克降后再翻序。对黯序结果进行分析表明，这三个序 列分为阿类，其中的 Fd3 与 Fa3、Fb3 在转录开始优点上游 190bp 左 右处开始出现差异，其具体原因有待进一步深入探讨。在这些上攒序 列中没有发现萌显的 TATA boxo 芫外我的基于 vsxl 基面的 cDNA 序 列设计了另一对特异引物 lS 和缸，使用 PCR 扩增出了一个长 2Kb 的 片段，将此片在纯化回收、克躁、割序。将拥序结果与 vsxl 基因的 cDNA 序列进行比对，确定它就是 vsxl 基因的基密组序列。同时还确 定金鱼 vsxl 基因食有 5 个外显子和 4 个内含子，推澜的氨基醋贱基 数为 363 个。 美键询:雄核发育革鱼. RAPD 分析，遗传相{肢，遗传距离，遗传 多样性， TAIL-PCR ，侧翼序列 Il ABSTRACT Part 1: RAPD analysis on genomic DNA of two artificial gynogenetic groups of grass carp ， Ctenopharyngodon ide//u Genetic similarity ， genetic distance and Shannon s genetic diversi ty of two different artificial gynogenetic grass carp groups and a control common grass carp group were analyzed with the methods of RAPD (Random Amplified Polymorphism DNA). One of the two different gynogenetic groups was a meiotic-mi to-gynogenetic grass carp group that was produced by artificial gynogenesis for two generations. Another gynogenetic group