乐脉颗粒对脑缺血耐受的影响及其作用机制的实验研究-神经病学专业论文.docxVIP

四川大学2002级硕士学位论文声 四川大学2002级硕士学位论文 声 明 本入声明所呈交的学位论文是本人在导师的指导下进行的研究工作 及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外， 论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成累，也不包括为获得西 川大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的 同志对本研究所作的任何贡献均已在论文中作了明确的说呗持表示落 意。 本学位论文成果是本人在四川大学读书期间在导师的指导下取得 的，论文成果归四川大学所有，特此声明。 申请人： 指导教师 四』l}大学2002捶硕士学位论文摘 四』l}大学2002捶硕士学位论文 摘 要 目的：鼹察局灶性的缺盘预处理对星形胶质缨赡(GFAP)活化、神 经元烯醇化酶(NsE)、神经营养因子(BDNF、bFGF)、舯瘤坏死因 子(TNF．a)表达的影响，以及给予乐脉颗粒干预治疗后的变化，探 讨神经营养因子及肿瘤坏死因子与缺血耐受的关系及其在内源性保护 机制中的作用。 方法：利用二次线栓法建立局灶性sD大鼠脑缺血耐受的动物模型。 60只SD大鼠随机分为①MCAO组：假手术+缺血组(SS+MCA0)②IP 组：预缺血+缺血组(IP+MCAO)⑧圳组：预缺血十乐脉颗粒+缺血 (IP+LM+MCA0)。IP组在首次给予预缺血lO分钟处理，三天后再次造 成2h犯^0，再灌注22h处死；眦Ao组利用假手术代替预缺血，三天后 造成2hMCAO，再灌注22h处死；uIf组在首次预缺血lO分钟处理后，待 大鼠嘛辞清醒后l小对，给予乐姝颓粒灌霹，帮量为：j．59／kg／O，三 天后再次造成2hMCAO，再灌注22h处死；每组20只。运用对sD大鼠 神经功能缺损评分。脑梗死体积的测定、光镜及电镜下组织病理改变、 Tunel染色及免疫组织化学染色和图像分析比较各组GFAP、NSE、 BDNF、bFGF、TNF．a的表达变化， 结果：①IP+MCAO组和IP+LM+MCAO组神经功能缺损评分、脑梗死体 积及凋亡细胞数较MCAO组减少，且在三组中减少最为明显。三组间 差异有统计学意义。超微结构：MCAO组损伤最严重，IP组超微结构 改变明显轻于MCAO组：LM组损伤较前两组均减轻。 ②三纽NSE和GFAP均有不同程度的表达，其中在LM组两者表达相对 明显，且伴有星形胶质细胞形态学的改变。NSE和GFAP阳性细胞数在 SS+MCAO组较IP+MCEO组减少，其【∞值分掰为2666 12圭359，72、 4 四川大学2002级硕士学位论_文35(30，53土143．34较IP+艟CAO组5459，82土605．14、6610．83士741．43减少 四川大学2002级硕士学位论_文 35(30，53土143．34较IP+艟CAO组5459，82土605．14、6610．83士741．43减少 (pO，05)。而IP+LM+MCAO组NSE和GFAP阳性细胞数9773．58士614．77、 11937，70士868．34较IP组5459．92主605．14、6610 93士74t，43衰达增高， 差异有统计学意义(po．05)。 ③神经营养因子；三组BDNF、bFGF的形态、分柱及数量上均有不同程 度的表达。其中两者在LM组表达最明显，其IOD值分别为 10919，23士657．64、 10269，45士661．04较IP组6826，35士703．37、 6943．78土446．56表达增高，两组间差异有统计学意义(p0．05)；对比 MCAO组3594．76土456．61、3995．65士321．62增高更为明显，差异有统计 学意义(p(0．01)。 ④肿瘤坏死因子： 三组的TNF—a均有不同程度的表达，其中McAO 组表达最明显1070432±584．雠，雨给予lP处理后表达明显减少 8109．53士57I，21，两者间差异有统计学意义(p0．05)，而在LM组TNF—a 的表达降低的更明显555024圭506，96。差异有统计学意义pO，01)。 结论：①局灶性缺血预处理】0分钟髓够对3天后的再梗塞提供脑保 护，诱导缺血耐受鲍形成， ②局灶性缺血预处理能够诱导缺血耐受的产生，其可能的机制之一是 通过促进星形胶质细胞活化增值，上调神经营养因子BDNF、bFGF(保 护性因子)的表达，下调炎症因子TNF—a(损伤性因子)的表达。 ③乐脉颗粒能够通过增强神经营养因子的表达，降低肿瘤坏死因子的 表达来增强局灶性缺血预处理诱导的缺血耐受， 关键词： 缺血预处理(IP) 缺煎耐受(rr) 大瘟中动脉梗塞 (MCAO)胶质纤维酸性蛋白(GFAP) 神经元特异性烯 醇化酶(NSE) 臆源性神经营养因子(BDNF)碱性成 四川大学2002级硕士学位论文纤维生长因子(