沙地樟子松外生菌根真菌功能及多样性研究-微生物学专业论文.docxVIP

摘 摘 要 近年来，在许多进行沙地樟子松引种栽培的地方，特别是科尔沁沙地东 南缘辽宁省章古台地区，出现了大颓积的苗术及部分较大树龄的樟子松树木 枯枝死亡、林地退化的现象。 本文研究了外生茵根真菌对樟予松生长的影响及其多样性之间的麓异。 包括樟予松林夕}生菌根真菌菌种采集，在实验室内模拟主要环境因子(pH、 水分、温度)对菌株生长的影响，羽间进行翁栽试验观测菌株对樟子松无菌 苗生长的影响，以及利用传统试验方法与分子生物学方法结合研究微生物区 系和外生菌根真菌多样性。主要研究结果如下： I．共采集到了4种外生菌根真麓，经过分离、鉴定，确定为：松乳菇(Lactarius deticlosus)、高大环柄懿(Macrolepiota procera),牛腮菌(Bolems sp。) 和孚L懿(Lactarius sp，)。 2．L．sp，在弱碱性分质中生长最好，鼹能忍受较毫躲水势，可以作为一株在碱 性地区造栋的首选燕檬，B．sp+在弱酸性环境巾生长较好，M．procera奁 pH值为4且用珏N锄调节的培养基上不能生长。聚乙二醇(Polyethylene Glycol,PEG．6000)浓度显著影媲莹橡生长。PEG浓度最裹时(30％PEG， ．15。3bar)，萤拣不能生长。鬟适PEG浓度是10％(-2。0bar)。终，主蓉摄真 莹熬最逶生长瀑度是25-28C。滋度窝予37Cj麓低予5℃时，酝骞试验蓉 拣均不能生长。三。deliciosus在翳骞PEG姣毽中，生长臻最攫。 3。雳三．Sp，帮B．sp．接耱棒子捡兹菡茧，5个嗣后，经嚣蜡秘片发瑷，殇箍与 樟子松幼簦形成萤摄。麓§嚣帮接菌簸理秘健瀵了樟子松翡蔼的生长。接 耱嚣．sp-．静蕾本根嚣比与对照稻玩，差异驻著。单独接释Lsp．帮B．sp．班 及旄磷耱并接稀三．sp．帮雷．sp．这4个楚瑾动蕾根长明鼗增加，与对照稻 院，箕平筠增长率分剐为68％、55％、55％和43％。藏氮联并混合接菌 豹处壤，株蠢最巍显著，与对照箨毙，平均璜长率为53％。接耪嚣．sp。 豹处壤，株蠢最巍显著，与对照箨毙，平均璜长率为53％。接耪嚣．sp。 的幼茵鲜重最高。与对照相比，平均增长率浅达201％。施氮肥辩接菌 的处瑗效果优于施磷肥并接菌的处理效果。 4．沙遗棒子松林主壤养分辍繇。缁蘩藕卖蘩静滂袄麓露稳麓，8秀裔达到最 大值，放线菌在10月份达到最大傻。30年左右林龄的樟子松林微嫩物数 墩最多。微生物数量和土壤养分之间存在相关性，可以作为评价肥力的指 舔。 5．确立了沙地雒嫩菌根真菌总DNA提取秘PCR扩增鸵方法，冀进一步研究 菌根真菌多样性提供了参考资料。 6．18S rDNA片段DGGE指绽图谱分析显示，入工林30年和天然秫45年 躲於生菠棂囊蕴相似度较巍。 关键词：树木外斑菌稂真菌：环境因子；按种：微生物：1 8S rDNA 沈阳农业大学硕士学位论文刖 沈阳农业大学硕士学位论文 刖 吞 一、蓥掇酝究瓣历变及瑗状 菌根(Mycorrhiza)是指±壤真菌与植物根系形成的共生体(Harley， 1983)。菌根的菌丝一端侵入植物根系，另一端延伸在土壤中，真菌主要从 寄囊植兹获取黥鬣耪震，露辩淘寄主穗镪撵供无税耪质(李浇稀，2002：Allen MF．1991)。早在19世缎中期，一些科学家就先蜃发现，水晶兰(Monotropa hypopitys L．)的根部常常被一层稠密的真菌菌丝体包围着，当时他们都一 致认为这建永晶兰的寄生真菌。直到几十年稻，俄阑科学家Kamienski(1881) 经过研究，首次搬出本磊兰根系上的凑萤楚绘檀物提供鸷养物鹱豹，露≤}寄 生菌，他认为这种真菌与水晶兰之间遐营共嫩生活的性质。Frank(1885，1887) 先搿研究了由毛榉、桦树及松树等的根系，发现这些植物根系也都有与水晶 兰类似熬凌象，嚣豆缝还发瑰，届是裰上鬟有这争争莲丝瑗象憝松糖，蒸生长 速度要比没有这种菌丝的松树快得多。他在描述这些树种根系与真菌蔚丝形 成的联合体时，在世界上首次使用了“Mycorrhiza’(菌根)这 术语。 裂19整纪寒，尽篱一些攀誊镄然谈势，藿羧是一耱病态臻象或寞萤与 植物生存的一种特殊形式，但菌根对植物的有益作用却不断被发现，加速了 人们对菌根的研究。20世纪中期，人们认识列自然界中绝大多数植物都有菌 鬏，麸褥旋明莹掖现象憝鸯然溽中静酱遮嚣象。甍辗的形态学、解翻学、分 类学以及菌报应用技术等研究都同时褥到了进一步发展。隧羞生命科学的发 展和研究方法的不断创新，以分子为基础的分子生物学技术，在菌根研究中 得到了广泛应稻。大量DNA分析新裁术在外生菌根真菌的分子遗传、分离 鉴寇、静躲亲缘关系等方嚣褥刘应用，与传统的萤投磅究方法撩圪，表现出 巨大的优越性。 嚣 嚣