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定向配基类 小分子类 VDAs 是利用抗体、 多肽或者生长因子选择性与肿瘤内皮组织结合, 并将其所携带的效应部分直接诱导, 或通过导致血管内皮细胞死亡而间接导致血栓形成, 进而引起宿主防御反应破坏肿瘤血管; 或者造成内皮细胞形态改变而生理性地阻塞肿瘤血管, 最终导致肿瘤细胞缺血缺氧而坏死。 细胞因子诱导剂 微管蛋白结合剂 联合细胞毒性和血管靶向剂 黄酮类：黄酮醋酸、二甲基磺醌醋酸等 如ZD6126、CA4P、AVE8062等 如TZT1027、OXi4503等 VDAs可分为两大类： 以tTF为效应因子的肿瘤血管靶向治疗 肿瘤血管靶向治疗的靶点十分重要,其效应因子也同样重要。效应因子可以直接诱发血栓、杀伤内皮细胞而间接引发血栓、改变宿主抵御力而攻击瘤血管或者引发内皮细胞形态改变而阻塞肿瘤血管,目前所用的效应因子有毒素、细胞毒性药物、细胞因子、细胞凋亡诱导剂和放射性同位素等,这些研究主要侧重于抑制或破坏肿瘤组织血管。1997Huang等表达抗肿瘤血管标志物的抗体与组织因子胞外区截断组织因(truncated TissueFactor,tTF)的融合蛋白,将抗体的特异性传递和tTF 潜在的凝血功能相结合,以tTF为效应因子靶向作用在肿瘤血管而选择性诱发肿瘤组织血管栓塞,在动物体内实验中有38%的肿瘤完全消退,由此建立了一种以 tTF作为效应因子,阻断肿瘤血供,引发肿瘤坏死的肿瘤血管靶向治疗方法。 组织因子 组织因子(TF)又称组织凝血活酶( Tissue Thromboplastin) 或组织凝血活酶(TissueThromboplastin Factor),即凝血因子Ⅲ(FactorⅢ,FⅢ)、细胞表面抗原 CD142, 是唯一不存在于正常人血浆中的凝血因子, 为外源性凝血系统的启动因子,也是体内活性最强的促凝物质之一。TF蛋白共含有263个氨基酸,分为三个区域:219个氨基酸组成的胞外区(1-219)、23 个氨基酸组成的跨膜区( 220-242)和21个氨基酸组成的胞质区( 243-263)。TF胞外区的 N 区和C区由两个免疫球蛋白区组成 ,与其促凝功能关系最为密切,其中C区靠近细胞膜的赖氨酸Lys165和Lys166是TF-FⅦa复合物识别底物的关键部位TF的胞质区末端含 3 个有功能活性的丝氨酸残基,为蛋白激酶C( PKC)的作用底物,其残基磷酸化具有细胞内信号传导功能,能促进VEGF的转录和合成。TF是外源性凝血级联反应的始发因子。凝血过程是一系列凝血因子被相继酶解激活的过程,最终生成凝血酶,形成纤维蛋白凝块。组织损伤释放的TF,在钙离子的参与下能与凝血因子Ⅶ(FⅦ)一起形成1∶1复合物,单独的FⅦ 或TF均无促凝活性,当FⅦ与TF结合会很快被活化的凝血因子Ⅹ(FⅩ)激活为Ⅶa,从而形成TF-FⅦ a复合物,后者比FⅦa单独激活FⅩ增强16000倍。 截短的组织因子 截短的组织因子(tTF)是全长组织因子(TF)的胞外区,缺乏跨膜区而由一段独特的肽序列终止,以可溶性蛋白的形式存在于血液中,它保留与FⅦ或FⅦa结合并活化FⅩ和FⅨ的活性,但由于tTF空间构象的改变和跨膜区的缺失使其失去促凝活力。经证实,tTF对FⅩ的活化能力是完整跨膜TF的10-5。研究表明,TF-Ⅶa复合物在带负电荷的磷脂膜表面能更有效地结合并活化FⅩ,因此,缺少膜内组分的tTF与FⅦ结合尽管不需要磷脂膜表面,但不能有效活化FⅩ,不是一种有效的凝血剂。当tTF借助靶向载体结合于肿瘤血管细胞膜表面后,tTF活化FⅩ的功能得到完全恢复,变成一种有效的凝血剂。研究证明,载体-tTF融合蛋白中的载体不仅特异性传递tTF,而且结合膜抗原后发挥了类似TF膜内组分的作用。同时,由于游离tTF对FⅩ活化能力很低及体内的正常抗凝作用,治疗剂量不会诱发正常组织血管栓塞。 tTF阻断肿瘤血管的研究进展 1997年Huang等通过制备抗肿瘤血管标志物MHCII的抗体与tTF的融合蛋白,融合蛋白通过抗MHCII抗体将具有潜在凝血的tTF传递到肿瘤血管,选择性诱发肿瘤组织血管栓塞,导致肿瘤衰退,建立了一种以tTF作为效应因子的肿瘤血管靶向治疗方法。这种以阻断肿瘤血管血流供应为目的的肿瘤分子靶向治疗已经引起相当关注。 Ran等以抗血管内皮细胞粘附因子1( VCAM-1)抗体作为载体介导tTF,结果tTF选择性定位于肿瘤血管,引发血栓形成, 尽管肿瘤未完全消退,但肿瘤生长速率降低了50%。虽然tTF在心脏和肺也存在,但并未形成血栓。他们用抗磷脂酰丝氨酸(PS)的抗体进行免疫组化发现,肿瘤内表达VCAM-1的血管同时也表达PS,但心和肺中并无 PS,于是他们得出血管表面的PS是凝血的必要条件。