课件：七基因诊断与基因治疗.pptVIP

基因治疗的应用与展望 应用 展望 遗传性疾病、心血管疾病、肿瘤、感染性疾病、神经系统疾病 进一步寻找切实有效的基因 精密调控外源基因在人体内的表达 体细胞移植和重建的生物学研究 减少外源基因对机体的不利影响 基因治疗有待解决的问题 1、难以获得真正有治疗作用的基因。 2、外源基因的表达难以在体内精确调控。 3、体细胞经体外培养后，其生物学特性会有 改变。 4、过多的外源蛋白对机体带来可能的影响。 5、随机整合潜在的威胁。 1999年9月，Arizona的Jesse Gelsinger因患鸟氨酸氨甲酰基转移酶(OTC)部分缺乏症在Pennsylvania大学接受基因治疗，4天后出现发热、凝血而死亡，成为死于基因治疗实验的第一个病人。 1. 导入基因的持续表达 基因治疗中存在的问题及解决方法 2. 导入基因的高效表达 3. 安全性问题---2002年法国 基因治疗存在问题与伦理学 1．导入基因的稳定/高效表达外源基因转移入病人体内细胞表达。 2．导入基因的安全性基因治疗的安全性应确保。不因导入外源目的基因而产生新的有害遗传变异。 3．试图纠正生殖细胞遗传缺陷或通过遗传工程手段来改变正常人的遗传特征则是引起争议的领域(伦理） 1999年9月，Arizona的Jesse Gelsinger因患鸟氨酸氨甲酰基转移酶(OTC)部分缺乏症在Pennsylvania大学接受基因治疗，4天后出现发热、凝血而死亡，成为死于基因治疗实验的第一个病人。 基因诊断与基因治疗（课堂练习） 1. 核酸分子杂交主要内容有 制备核酸样本 B. 制备与标记特异探针 C. 核酸样本的分离、变性、转移和固定 预杂交、杂交和漂洗 E. 检测杂交信号 下列是常用核酸杂交方法的用途，错误的是 Southern 印迹杂交法可用于检测特异RNA序列片断 Southern 印迹杂交法可用于检测特异DNA序列片断 Northern印迹杂交法可用于检测DNA或RNA Northern印迹杂交法可用于检测RNA 原位杂交法可用于检测组织细胞中的DNA或RNA 3. 以下是关于PCR技术的叙述，错误是 PCR技术进行体外DNA扩增，其过程不同于体内DNA复制过程 需要目的DNA两条链为模板 需Taq 酶代替DNA聚合酶 需RNA引物代替DNA引物 PCR需要DNA变性、复性和延伸3个步骤的反复循环 基因诊断常用技术有 核酸分子杂交 B. 聚合酶链反应 基因芯片 D. 基因测序 E. 以上都可以 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 * 如腺苷脱氨酶（ADA）缺乏症、膀胱纤维症和家族性血胆脂醇过多症（血清胆固醇高）；血友病等遗传病；恶性黑素瘤、神经细胞瘤、白血病、肾癌、卵巢癌和脑癌等癌症；以及肝功能衰竭和艾滋病等。 * 腺苷脱氢酶(ADA)基因缺陷症是一种免疫缺陷病 腺苷脱氢酶(ADA)基因缺陷症是一种免疫缺陷病，对患者采用基因治疗的方法是：取出患者的白细胞，进行体外培养时转入正常ADA基因，再将这些白细胞注入患者体内，使其免疫功能增强，能正常生活。下列有关叙述中，正确是A正常ADA基因替换了患者的缺陷基因B正常ADA基因通过控制ADA的合成来影响免疫功能 正常人 纯合突变 杂合突变 Leber 病患者 PCR/SSCP分析 + ﹣ DNA链末端合成终止法 基因测序 （四）基因芯片 阅读课本，思考： 基因芯片与基因诊断有什么关系？ 基因芯片有什么优点？ 基因芯片有哪些应用？ 基因芯片技术 三、基因诊断的应用 遗传疾病 肿瘤 感染性疾病，传染性流行病 判断个体疾病易感性 器官移植组织配型 法医学中个体识别、亲子鉴定 肿瘤基因诊断的策略 检测肿瘤相关基因 癌基因、抑癌基因、肿瘤转移基因 检测肿瘤相关病毒的基因 鼻咽癌—EB，宫颈癌—HPV 检测肿瘤标志物基因或mRNA 肝癌—甲胎蛋白（AFP） 结肠癌—癌胚抗原（CEA） 肿瘤相关基因的检测 ㈠ras癌基因的检测 ras基因中最常见的点突变是第12，13或61密码子突变 检测方法： PCR/ASO PCR-SSCP ㈡ p53的检测 p53基因突变主要为点突变，热点区域位于密码子130~290 检测方法： PCR—SSCP PCR—测序 PCR—RFLP 第 二 节  基 因 治 疗Gene Therapy 基因修正(gene correction)：定点导入外源正常基因，代替有缺陷的基因，对