尸体肾脏生物力学和生物化学时序性变化推断死亡时间的研究-法医学专业论文.docxVIP

万 万方数据 学位论文原创性声明 本论文是我个人在导师指导下进行的工作研究及取得的研究成果 。论文 中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或其它机构已经发表或 撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均己在论文中以 明确方式标明 。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担 。 作者签名 : 主主 日期:主a_年_2_月_3_Q_ EI 学位论文使用授权声明 本人授权汕头大学保存本学位论文的电子和纸质文档，允许论文被查阅 和借阅 : 学校可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索， 可以采用影印 、缩印或其它复制手段保存和汇编论文 : 学校可以向国家有关 部门或机构送交论文并授权其保存、借阅或上网公布本学位论文的全部或部 分内容。对于保密的论文 ，按照保密的有关规定和程序处理。 本论文属于 : 保密( )，在 年解密后适用本授权声明 。 不保密( )0 (请在以上括号内打 YJ 作者签名 : 土 主 导师签名 : 口期: 2t I件 年_5_月 日 日期: 汩|午 年 月二旦日 汕头大学医学院硕士学位论文 摘要 目的和意义 推断死亡时间(PMI)一直是法科学与法医实践中重要的历史性难题。本实验在前实 验基础上，利用多项技术检测肾脏组织生物力学和生物化学指标，结合形态学、量化病 理学及生物、生化指标与 PMI 相关方程，综合分析，相互验证，组合地推断 PMI。 材料与方法 本地屠宰场放血处死的成年家猪，提取肾脏组织，保湿运输，置于恒温恒湿人工气 候箱，每隔 12h 时间点在标准化拍照装置拍照并观察记录肾脏组织的大体形态学，规范―六 定‖取材肾脏远离肾门部位肾皮质，分别常规 4%甲醛和 80%乙醇固定，制备标准化生物 力学试件和固定-萃取液检材，常规制备肾组织石蜡切片并 HE 染色。利用 Photoshop CS5 软件测算肾大体照相同一部位 RGB、R、G 和 B 值；用 Image-Pro Plus 6.0 显微量化分析 HE 染色组织，计算肾细胞核总面积、组织间隙总面积(Total area)、及其总 IOD 值、RGB 值密度、面积与边界的比值等指标。利用便携式生物力学检测仪(KDI-0.2) 行纵轴单向压 缩检测甲醛和乙醇固定的肾组织试件，记录力-变形曲线、极限载荷、弹性模量、平均力、 应变等数据。PH 计测定甲醛和乙醇固定-萃取液 PH 值；利用分光光度法检测固定-萃取 液色度、吸光度以及茚三酮反应后吸光度值。 采用 SPSS16.0 、GraphPad Prism 5 统计软件和 Excel2003 对所得数据进行分析，取 均数和标准差，采用 t 检验及方差分析，P0.05 为显著性差异和有统计学意义。 结果 ⑴ 家猪肾组织大体 RGB 取色以 G、B 值较佳，G、B 值均于 0h-84h 上升，间隔 12h 组间比较 p0.05，与 PMI 回归方程分别为 YG=0.5292X+78.5，R2=0.9113；YB=0.5088X+ 73.71，R2=0.9057。84h-144h 变化趋势不明显。各组 R 值无统计学意义。 I 汕头大学医学院硕士学位论文 ⑵肾组织 HE 染色切片细胞核总面积及总 IOD，0h-48h 明显下降，间隔 12h 组间差 异显著 P0.05。组织间隙总面积及 IOD，36h～216h 逐渐增大，间隔 24h 组间差异显著 P0.05，相关回归方程：细胞核总面积 Y=－10.347X+53.977，R2=0.9353；细胞核总 IOD 方程：Y=－11.485X+59.479，R2=0.9384；组织间隙总面积 Y=20.663X+4.08，R2=0.9405； 细胞间隙 IOD 方程：Y=50.448X+1.1829, R2=0.9343。 ⑶甲醛和乙醇固定的肾组织的生物力学检测，在―窗口期‖内极限载荷、弹性模量、平 均力参数均呈下降趋势，与 PMI 有统计学意义 P0.05。甲醛固定的回归方程分别：―窗口 期‖为 12h-60h, Y=－0.46X+31.29，R2=0.8235；―窗口期‖为 0h-60h,Y=－1.418X+90.17， R2=0.8175；―窗口期‖为 0h-48h, Y=－0.1054X+6.669，R2=0.9167。乙醇固定的回归方程分 别：―窗口期‖为 48-108h, Y=－0.5260 X +69.87，R2=0.8923；―窗口期‖为 48-120h，Y=－ 3.446X+442，R2=0.8310；―窗口期‖为 48-96h，Y=－0.1630X+19.91，R2=0.6695。 ⑷甲醛和乙醇的固定-萃取液检测，PH 值随 PMI 时序性变化不明显，无统计学意义。 乙醇固定-萃取液 350nm 色度值的