利多卡因对大鼠缺血脑损伤后谷氨酸及细胞凋亡的影响-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

塑型查里!!堕塑壅圭兰些丝皇 塑型查里!!堕塑壅圭兰些丝皇 型查±圈堕丛坐墅塑堕亘查堑堕塑塑堕塑￡堕点巳咀 利多卡因对大鼠缺血脑损伤后谷氨酸及细胞凋亡的影响 硕士掌位申请人：罗先润 推荐导师：王明臣教授 孟庆恒主任医师 中文摘要 研究目的急性脑血管病、心肌损伤、心脏骤停、中毒等因素引起的脑缺血缺氧， 是临床上常见的中根神经系统损伤的病因，目前认为参与缺血后脑损伤的机制 有：f1)兴奋性氨基酸所致的神经毒作用；(2)自由基的损伤作用；(3)缺血后神 经元出现ATP耗竭，细胞内Ca2+超载，线粒体通透性改变(MPT)；(4)细胞缺 血后某些新凋亡效应因子基因表达诱导凋亡过程；(5)炎症反应。近年来，利多 卡因对缺血后的脑损伤的保护作用日益引起学者们的关注，相关的保护性作用及 机制的研究开展较多。利多卡因(1idocaine，LDC)是临床广泛应用的局麻药，除 了用于麻醉的作用外，也可以治疗室性心律失常。本研究旨在探讨利多卡因对缺 血脑损伤后脑内谷氨酸含量和细胞凋亡的影响，以便在临床上在复合病症中选择 用药积累实验性资料。 方法雄性sD大鼠，8～12周龄，体重170～210克，共40只，随机分成4组， 每组10只。采用暂时夹闭颈总动脉，于颈外动脉逆行插管，注入栓子溶液，同 时开放颈总动脉，使栓子进入大脑各动脉，造成多发性脑栓塞动物模型。I组为 正常对照组，II组为假手术组，III组为手术造模型组，Ⅳ组为手术模型加利多卡 因治疗组，手术后24h将大鼠断头处死，立即在冰盘上丌颅取脑，分离左侧海马， 制备组织匀浆，取上清夜，用高效液相色谱法测定谷氨酸含量。分离右侧海马， 用10％多聚甲醛固定、切片，做HE染色验证海马解剖结构及其组织形态，免疫 组化染色测定Bax蛋白的表达，TUNEL法检测细胞凋亡。 结果L脑内谷氨酸含量的变化：(1)与正常对照组比较，假手术组海马组织中谷 郑卅『人学2005研究生毕业论文 郑卅『人学2005研究生毕业论文 利多卡凶对缺I札腩损伤后谷氢堕塑塑堕塑立塑壁堕 氨酸含量虽有升高，但统计学处理无显著性差异(pO．05)；(2)模型组与对照组相 比，谷氨酸含量显著升高有显著性差异(pO．05)。(3)给药组与模型组相比谷氨酸 含量虽降低，但无显著性差异(pO．05)。2．HE染色结果：对照组神经细胞结 构正常，假手术组有少量神经元轻度水肿，仅见少量坏死，手术造模组有明显神经 元水肿，并有大片坏死。给药组损伤较轻，坏死灶较手术造模组少。3．TUNEL染 色结果：(1)对照组几乎没有阳性凋亡细胞，假手术组有少量的凋亡细胞，两组之 阳J无显著性差异(pO．05)。(2)与对照组相比，模型组凋亡细胞数明显增高，统 计学处理有显著性差异(p(O．05)：(3)与模型组相比，给药组凋亡细胞数明显降低， 有显著性差异(pO．05)。4．Bax蛋白免疫组化显示：Bax蛋白在各组中均有表达。 (1)与对照组相比，假手术组阳性细胞数虽有增多，但无显著性差异(p)O．05)， 模型组Bax蛋白阳性细胞数明显增多，有显著性差异(pO．05)，(2)治疗组与模型 组相比，Bax蛋白阳性细胞数明显下降，有显著性差异(pO．05)。 结论1．利多卡因降低了脑缺血损伤后谷氨酸的水平，但无统计学意义；2．利多 卡因降低脑缺血损伤后神经细胞Bax蛋白的表达；3．利多卡因可能抑制脑缺血损 伤后神经细胞的凋亡。 关键词；利多卡因；谷氨酸；脑缺血损伤；受体；凋亡 塑型丛兰!!堕堑塑圭望些丝塞 塑型丛兰!!堕堑塑圭望些丝塞 型墨±垦堕墼垒墅塑鱼星查壑墼塑垫塾塑圭盟壁堕 Effect of lidocaine 011 the level of glutamate and cell apoptosis in rat brain after ischemic injury Postgraduate Luo xiannm Tutor Wang ming chen；Meng qing huan Background and 0bjective：Brain anoxemia caused by such factors aS acute cerebrovascular injury、cardiac muscle injury、cardiac arrest、toxicosis and SO on is the common pathogeny of the central neural system injury．The mechanism of ischernic injury held nowadays is：(1)cytotoxicity oftoluene caused by excit