课件：原发性肝癌的基因治疗.ppt

设计策略： 反义RNA表达载体的构建 反义RNA的体外微注射 脂质体携带反义RNA 核酶嵌合反义RNA 诱导细胞内反义RNA的产生 具体方法： A. 反义RNA表达载体的构建： 利用基因重组技术，在适宜的启动子与 终止密码子之间反向插入一段靶基因，构建人工反义RNA表达载体后再转化入致瘤的细胞内，反义RNA就能抑制或消除细胞内源性靶基因所编码mRNA表达，使致瘤细胞丧失致瘤性。 例如将反义IGF-1受体基因的表达载体转入肝转移癌细胞株中，可抑制癌细胞生长，提示反义基因具有下调被转化细胞恶性表型的作用。 B. 反义RNA的体外微注射： 利用纯制的噬菌体RNA聚合酶来产生反义RNA再通过微注射入细胞中。该疗法主要的优点是被转入细胞能提供反义RNA合适的细胞环境，无需启动子或载体，亦不存在细胞摄入障碍或降解、取代等问题。 C.脂质体携带反义RNA： 可用于体内、外系统，目前最有希望的三种制剂：抗体-定向脂质体，阳离子脂质体，中性脂质体，如将人工合成的反义寡核苷酸与亲脂嵌合剂或载入脂质体相连接，既可增加穿透细胞膜的能力，提高归巢性，亦可通过嵌入碱基对之间提高反义RNA的稳定性和生物功能。 D.核酶嵌合反义RNA： Ribozyme能在某些特异的碱基序列GUC或CUC位点裂解与其杂交的RNA分子。