联合使用5-氟尿嘧啶和低分子肝素钠预防兔眼PVR的疗效研究-眼科学专业论文.docxVIP

中国镑和医科大学襁噱鞋学专业毕业论文英文缩写 中国镑和医科大学襁噱鞋学专业毕业论文 英文缩写 Abbreviation 缩略语 英文全称 中文全称 PVR proliferative Vitreoretinopathy 增殖性玻璃体视网膜病变 RPE retinal pigment epithelium 视网膜色素上皮 PBS phosphate buffered saline 磷酸缓冲盐溶液 RRD rhegmatogenous retinal 孔源性视网膜脱离 detachment NCS newborn calfserum 新生牛血清 EDrrA ethylenediaminetetraacetic acid乙二胺四乙酸 DMEM Dulbecco’S modified Eagle’S改良极限必须培养基 Medium rpm rotations per minute 每分钟转数 5．Fu 5一flurouraciI 5．氟尿嘧啶 LMWH low molecular weight heparin 低分子肝素 PDGF platelet derived growth factor 血小板源性生长因子 TGF—B transforming gm叭h factor-13 转化生长因子一13 FN fibronectin 纤维连接蛋白 2 中国铷番{医科夫学临瘫医学专业毕业论文联合使用5-Fu和LMWH预防 中国铷番{医科夫学临瘫医学专业毕业论文 联合使用5-Fu和LMWH预防 兔眼PVR的疗效研究 摘要 第+部分兔眼RPE细胞的分离和培养 目的：分离培养RPE细胞，观察其体外生长情况。 方法：采用酶消化法分离有色素兔眼RPE细胞，加入含20％新生牛 血清的DMEM／F12混合培养基，置于37℃、5％c02的培养箱中培 养。细胞生长近汇合时，按l：2或者】：3进行传代。倒置显微镜下 观察原代及传代细胞的贴壁和生长情况。鼠抗人细胞角蛋白抗体对培 养的RPE细胞进行免疫组化鉴定。 结果：采用以上方法获得了大量的兔眼RPE细胞。原代RPE细胞在 12小时内贴壁，贴壁率为45±5％。细胞贴壁后呈圆形，胞浆内充满 黑色素颗粒。8天后细胞生长近汇合。随着传代次数的增加，胞浆中 的色素颗粒逐渐减少，细胞呈纤维样生长。细胞角蛋白抗体免疫组化 染色绝大多数呈阳性。 第二部分PVR模型的建立和药物疗效的观察 目的：评价灌注液中加入5．Fu和LWMH抑制玻璃体切除术后兔眼 PVR发生的疗效。 方法：将传三代或传四代RPE细胞配制成5×105／0．1m]的细胞悬液。 再接种法判定细胞活性在90％以上。采用中轴部玻璃体切除术切除 20只兔40只眼的玻璃体。手术结束前36只兔眼玻璃体腔内注射0．1ml 中国协和医科大学龉臻医学专监毕监论文细胞悬液。右眼均以含5一Fu 中国协和医科大学龉臻医学专监毕监论文 细胞悬液。右眼均以含5一Fu 200mg／ml、LMWH 5IU／ml的O．9％生理 盐水作为灌注液；左眼单用O．9％牛理盐水作为灌注液。术后用间接 检眼镜观察眼底，进行PVR分级，弗做眼底彩色照相。术后第】天 和第7天分别处死一只未注射细胞的白兔，进行电镜和光镜检查，评 价药物毒性；4周后将其余白兔处死，进行光镜检查。 结果：3只兔术后并发白内障，1只兔术后10天死亡，不计入观察。 14只兔28只眼内分别出现了不同程度的增殖。使用x 2检验进行统计 学分析，术后1周药物组和对照组PVR的发生有显著差异，2周和4 周时没有显著差异。电镜和组织病理学检查未发现药物对视网膜有毒 副作用。 结论：采用酶消化法可以获得大量的RPE细胞，细胞纯度较高。体 外生长的RPE细胞形态上发生了很大的变化。在本次试验条件下， 使用含5一Fu 200mg／mt、LMWH 51U／ml的O．9％生理盐水作为灌注液， 对玻璃体切除术后兔眼PVR的发生只有短期抑制效果。 关键词：视网膜色素上皮细胞培养增殖性玻璃体视网膜病变低分 子肝素，5一氟尿嘧啶 中国协和睦科大学龉廉医学专监毕业论文Adjuvent 中国协和睦科大学龉廉医学专监毕业论文 Adjuvent 5-Fu and LMWH Prevents PVR in Rabbit Eyes Abstract Part I Culture of RPE Cells from pigmented rabbits Purpose：To isolate and culture RPE cells from pigmented rabbits．To observe their growth status in vitro Method：RPE cells were isolated by enzymatic digestion m