第四章--肠道菌群的.pptVIP

大肠菌群的产气量，多者可以使发酵倒管全部充满气体，少者可以产生比小米粒还小的气泡。如果对产酸但未产气的乳糖发酵如有疑问时，可以用手轻轻打动试管。 全部为0，报告为 ＜最低检出线 如样品中大肠菌群较少，可加大接种量，采取双料发酵管 CFU 通过数据直接求数学期望 根据标准要求或对污染情况的估计，选择2～3个适宜稀释度，分别在稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿。 将凉至46℃结晶紫中性红胆盐琼脂培养基（VRBA平板）注入平皿约15～20mL，并转动平皿，混合均匀。同时将1mL稀释液（不含样品）作空白对照。 待琼脂凝固后，倒入3～4mL VRBA培养基铺面，培养基凝固后翻转平板，置36±1℃温箱内培养18～24h。 选取菌落数在15～150之间的平板，分别计数典型和可疑大肠菌群菌落。 典型菌落为紫红色，菌落周围有红色的胆盐沉淀环，菌落直径约为0.5mm。 ?从VRBA平板上挑取10个不同类型的典型和可疑菌落，分别移种于BGLB肉汤管内，36?℃±1?℃培养24?h～48?h，观察产气情况。凡BGLB肉汤管产气，即可报告为大肠菌群阳性。?? ??经最后证实为大肠菌群阳性的试管比例乘以计数的平板菌落数，再乘以稀释倍数，即为每g（mL）样品中大肠菌群数。 例：10-4样品稀释液1?mL，在VRBA平板上有100个典型和可疑菌落，挑取其中10