沙门氏菌invH基因亚单位疫苗和C3d分子佐剂核酸疫苗的制备与免疫效果分析-预防兽医学专业论文.docxVIP

山东农业大学硕士学位论文 山东农业大学硕士学位论文 沙门氏菌 沙门氏菌 invH 基因亚单位疫苗和 C3d 分子佐剂核酸疫苗的制备与免疫效果研究 PAGE PAGE 1 PAGE PAGE 2 中 文 摘 要 沙门氏菌是重要的肠道病原菌，根据抗原的不同分为 2500 个血清型，绝大多数沙 门氏菌对人和动物都有致病性，并是人类食物中毒的主要病源之一，严重影响着人和动 物的健康。因而，通过探讨沙门氏菌 invH 基因的免疫功能，对研制新型疫苗防治沙门 氏菌病具有重要意义。本研究采用分子生物学技术，首先将沙门氏菌Ⅲ型分泌系统的 invH 入侵基因进行了克隆表达，然后制备了重组蛋白疫苗和 C3d 分子佐剂核酸疫苗， 通过细胞转染和动物试验，探索了 invH 的免疫功能，取得了预期的效果。本研究分三 部分内容： 一、不同来源沙门氏菌入侵基因 invH 的检测及序列分析 根据沙门氏菌 invH 基因序列设计一对引物，用聚合酶链反应技术对 9 株沙门氏菌 和 4 株常见病原菌进行 PCR 扩增，并将扩增出的 invH 基因进行克隆及序列分析，应用 生物信息学方法预测 invH 蛋白的 T 细胞抗原表位。结果发现，9 株沙门氏菌 PCR 均扩 增出 519bp 的特异条带，4 株非沙门氏菌均无特异带扩增；核苷酸序列分析证实，9 株 菌中 3 株鼠伤寒沙门氏菌之间同源性为 99.