蓝隐藻叶绿素蛋白复合物特性及其能量传递关系研究-海洋生物学专业论文.docxVIP

烟 烟 台 大 学 硕 士 学 位 论 文 I万方数据 I 万方数据 摘要 以自行培养的蓝隐藻（Chroomonas placoidea）为材料，对其活体细胞以及类囊 体膜的吸收光谱、室温和低温（77K）荧光光谱特性进行了研究。提出蓝隐藻活细胞 中部分藻蓝蛋白（PC）为游离存在，且与类囊体膜之间动态结合的观点；发现 Chl a 和 Chl c 吸收的光能更倾向于传递给了 PSⅡ或短波长 Chl a，而 PC 吸收的光能在两 个光合系统之间均有分配，并且主要对长波 Chl a 的荧光有贡献；在蓝隐藻活体细胞、 类囊体膜、PSⅠ核心复合物和 PSⅠ颗粒复合物的 77K 荧光光谱中，均未发现属于高 等植物 PSⅠ的 730nm 附近的长波荧光峰，表明隐藻在 PSⅠ结构和能量传递方式上 与高等植物相比存在特异性。 采用蔗糖密度梯度离心方法分离到 5 种活性的叶绿素蛋白复合物及 9 种亚复合 物，其中包括一个文献未曾报道的大分子量的 PSⅠ核心复合物。对各复合物和亚复 合物的吸收光谱、室温和 77K 低温条件下的荧光光谱特性以及多肽组成做了系统的 分析；并尝试利用圆二色谱（CD）谱技术对分离到的三种叶绿素蛋白复合物进行了 190~750nm 的扫描和初步解析，给出了 3 种不同性质的隐藻叶绿素蛋白复合物的远 紫外区（190~250nm）、近紫外区（250~340nm）和可见光区（400~750nm）的光谱 测定，结果显示：①远紫外区：二级结构预测表明各复合物的无规卷曲比例相近， 约占 30%左右；PSⅠ颗粒较之 PSⅡ和捕光复合物含有更高比例的 α-螺旋和 β-转角， 但几乎不存在 β-折叠。②近紫外区：在芳香族氨基酸的三级结构信号区，各复合物 均未观测到 Tyr 的信号峰。③可见光区：690nm 附近信号峰的有无是隐藻捕光复合 物和中心复合物的一个区别。实验结果不仅给出了隐藻叶绿素蛋白复合物性质的新 信息，补充了隐藻叶绿素蛋白复合物性质研究的空白，也为叶绿素蛋白复合物的分 析和鉴定提供了新的光谱鉴定依据。 关键词：蓝隐藻；藻蓝蛋白-叶绿素蛋白复合物；77K 荧光光谱；圆二色谱；能量 传递 万方数据 万方数据 Abstract The absorption and fluorescence spectral characteristics at room temperature and 77K of intact cells and thylokoids of Chroomonas placoidea, which are cultured by our laboratory, are determined and analyzed. It is proposed that a portion of phycocyanin （ PC ） in intact cells is in a free state, and can be dynamically combined with thylakoids; It is also found that the excited energy absorbed by Chl a and Chl c tend to transfer to PSⅡor short wavelength of Chl a, while light energy absorbed by PC is assigned to both two photosystems, and contribute mainly to fluorescence emitted by long wavelength of Chl a; There is no 730nm long wavelength of fluorescence, which is designated as characteistic fluorescence of PSⅠin higher plants, are observed in 77K fluorescence spectra of intact cell, thylakoid membrane, PSⅠcore complex and PSⅠparticles. This result shows that the cryptophytic algae is distinct from higher plants in both structure and in energy transfer of PSⅠ. By using the method of sucrose density gradient centrifugation,