第九章动物实验基本技术研究生课.ppt

动物实验常用技术 黄文革 TEL 概念 动物实验 动物实验技术 3R原则 实验动物福利 实验动物伦理 安死术 动物实验 是指以实验动物为对象和材料，在设计的条件下进行实验或者检测，观察、记录反应过程和结果的活动过程。 动物实验技术 是实施动物实验的重要手段，在不同的研究领域有不同的目的和应用，但一些基本操作技术是共同的。 3R原则 实验动物替代方法的简称，是实验动物福利的核心内容 替代（ Replacement ） 减少( Reduction） 优化 （Refinement） ①替代 是指使用低等级动物代替高等级动物，或不使用活着的脊椎动物进行实验而采用其它方法达到与动物实验相同的目的 ②优化 是指通过改善动物设施、饲养管理和实验条件，精选实验动物、技术路线和实验手段，优化实验操作技术，尽量减少实验过程对动物机体的损伤，减轻动物遭受的痛苦和应激反应，使动物实验得出科学的结果。 ③减少 是指在科学研究中在动物实验时使用较少量的动物获取同样多的试验数据或使用一定数量动物能获得更多的试验数据的科学方法。 实验动物福利 是指善待实验动物，即在饲养管理和使用实验动物活动中，采取有效措施，保证实验动物能够受到良好的管理与照料，为其提供清洁、舒适的生活环境，提供保证健康所需的充足的食物、饮用水和空间，使实验动物减少或避免不必要的伤害、饥渴、不适、惊恐、疾病和疼痛。 实验动物伦理 是指在实验动物生产、使用活动中，人对实验动物的伦理态度和伦理行为规范，主要包括尊重实验动物生命价值、权利福利，在动物实验中审慎考虑平衡实验目的、公众利益和实验动物生命价值权利。 安死术 是指以人道的方法处死动物的技术，使动物在没有惊恐和痛苦的状态下安静地并在尽可能短的时间内死亡。 动物实验操作技术的主要内容 第一节、动物实验前的准备 第二节、实验动物的捉拿与固定 第三节、实验动物的麻醉 第四节、供试品的给予方法 第五节、各种检验标本的采集方法 第六节 实验动物的安死术 第七节 尸体检查及脏器标本采集原则与 检查方法 第八节 实验外科的基本操作技术 第九节 动物实验中的安全防护 第十节 动物实验后废弃物的无害化处理 第一节 动物实验前的准备 一、动物实验室的选择 二、实验动物的购买 三、实验动物编号与标记 一、动物实验室的选择 1.根据实验目的选择合适的实验室及饲养室。所使用的动物实验室必须取得实验动物使用许可证，并包含实验所用动物的适用范围。 2.动物实验室要与实验动物同等级别。 如：普通级的兔，可以在SPF级动物实验室做实验吗？ 3.饲养室应符合实验动物的生活习性及国家实验动物设施各项标准。如：用猴子做实验。 实验类别和实验动物与实验环境的对应表 二、实验动物的购买 1.应购买有实验动物生产许可证的单位所生产繁殖的实验动物，并应索取相应品系的实验动物的质量合格证明。 2.如果从外地购买的动物，应考虑运输中的各种因素对实验动物的影响，并应查阅运输检疫证明。 3.购买的动物需要经过2-14天的隔离检疫、观察。 三、实验动物编号与标记方法 （一）染色法 （二）穿耳孔法 （三）标牌法 （四）烙印法 （五）剪毛法 三、实验动物编号与标记方法 （一）染色法： 1、单色涂染法：常用染色剂：3-5％苦味酸溶液，可染成黄色。在每组动物不超过l0只或一个实验不超过40只的情况下适用。 实验动物：白化的大鼠、小鼠。 方法步骤： (1)涂染原则：从左到右、从上到下。 (2)左前肢为l号、左侧腹部2号、 左后肢3号。 (3)两耳后部4号、背中部5号、 后肢背部6号。 (4)右前肢7号、 右侧腹部8号、 右后肢9号。 (5)尾巴根为10号。 （6）额部为20号 2、双色涂染法： 常用染色剂： (1)3-5％苦味酸溶液，可染成黄色。 ——作为“个”位数。 (2) 0.5%中性红或品红溶液，可染 成红色。——作为“十”位数。 在每组动物不超过100只的情况下适用。 实验动物：大鼠、小鼠。 方法步骤： (1) 用两种颜色同时进行染色标记。 (2) 用苦味酸(黄色)染色标记作为个位数，个位数的染色标记方法同单色涂染法。 (3) 用品红(红色)染色标记作为十位数， （4）左前肢为10号、 左侧腹部20号、 左后肢30号， 两耳后部40号、 背部50号、 后肢背部60号， 右前肢70号、 右侧腹部 80号、 右后肢90号 第10