山东银莲花组织培养植株再生体系的建立-江苏农业科学.PDFVIP

江苏农业科学　２０１８年第４６卷第２４期 — ４７— 陈春利，顾德政，刘　毓，等．山东银莲花组织培养植株再生体系的建立［Ｊ］．江苏农业科学，２０１８，４６（２４）：４７－５０． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１８．２４．０１０ 山东银莲花组织培养植株再生体系的建立 １ １ ２ ２ １ 陈春利 ，顾德政 ，刘　毓 ，孟清秀 ，李可勤 （１．山东农业工程学院，山东济南２５０１００；２．济南市花卉研究所，山东济南２５０１００） 　　摘要：以山东银莲花无菌幼嫩茎段为外植体，研究其组织培养和植株再生技术。结果表明，用 １％ ＨｇＣｌ处理 ２ １０ｍｉｎ可以降低外植体污染率、褐化率，且存活率较高；最佳增殖培养基为ＭＳ＋１．０ｍｇ／Ｌ６－苄氨基腺嘌呤（６－ＢＡ）＋ ０２ｍｇ／Ｌ －萘乙酸（ＮＡＡ）＋２５ｇ／Ｌ蔗糖＋６ｇ／Ｌ琼脂，培养３０ｄ后增殖系数为３．４３；最适生根培养基为１／２ＭＳ＋ α １０．０ｍｇ／Ｌ吲哚丁酸（ＩＢＡ）＋３５ｇ／Ｌ蔗糖＋６ｇ／Ｌ琼脂，生根率为８４．４０％；最佳组培苗移栽基质配比为珍珠岩、蛭石、 草炭的体积比＝１∶２∶２。山东银莲花组培再生体系的建立为进一步探讨其遗传多样性奠定了基础。 　　关键词：山东银莲花；组织培养；植株再生；外植体 ＋ ＋ 　　中图分类号：Ｓ６８２．１９０．４３　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１８）２４－００４７－０３ 　　山东银莲花［Ａｎｅｍｏｎｅｓｈｉｋｏｋｉａｎａ（Ｍａｋｉｎｏ）Ｍａｋｉｎｏ］是毛 取山东银莲花带顶芽幼嫩茎段，用毛笔蘸洗衣粉水轻轻 莨科（Ｒａｎｕｎｃｕｌａｃｅａｅ）银莲花属（Ａｎｅｍｏｎｅ）植物朝鲜银莲花 刷洗其表面灰尘，然后放入干净的容器中，在流水下冲洗 １～ ［１］ （Ａｎｅｍｏｎｅｃｈｏｓｅｎｉｃｏｌａ）的变种 ，属于多年生草本植物，特产 ２ｈ，再用０．５％多菌灵粉剂浸泡 １５ｍｉｎ，随后用蒸馏水冲洗 于山东东部，以崂山、昆嵛山为分布中心，常生于海拔５００ｍ ３～１０次，最后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分。 以上的山坡草丛及阴湿林下，崂山之崂顶及昆嵛山之泰礴顶 外植体灭菌：将处理完的茎段转移至三角瓶中，在超净工 ［２］ 附近草丛中常见其生长 。海拔、生境等对其分布具有一定 作台内先用７５％乙醇消毒３０ｓ，之后用无菌水冲洗３次，然后 的影响，因此其分布极其狭窄，属于典型的稀有物种，由于崂 用１％ＮａＣｌＯ分别处理１０、２０、２５ｍｉｎ，再用０．１％ＨｇＣｌ分别 ２ 山、昆嵛山两地均为旅游景区，山东银莲花的生境破坏严重， 处理８、１０、１３ｍｉｎ，在灭菌过程中滴加 １～３滴吐温并充分摇 ［３］ 使得该物种更加稀有 。山东银莲花为我国的特有种质资 晃三角瓶，使杀菌剂与外植体充分接触，最后用无菌水冲洗 源，国外还未见相关研究报道，而国内目前对其报道也很少， ６～１０次，将长为 １～２ｃｍ的茎段接种到含有 ０．２ｍｇ／Ｌ 最早可见的报道是臧得奎等在 １９９９年对山东特有野生花卉 ６－ＢＡ的ＭＳ启动培养基中。每个培养瓶中接种 １个外植 ［２］ 进行的初步研究 。２０１１年，徐晓艳等对山东银莲花种子萌 体，每个处理接种３０瓶，重复３次，７ｄ后观察外植体的灭菌 ［４］