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香菇多糖磷酸化修饰工艺条件的研究。
张 难h2,吴远根h3,莫莉萍4,邱树毅1’3,王文平1’3
1(贵州省发酵工程与生物制药重点实验室,贵州贵阳,550003)2(贵州大学生命科学学院,贵州贵阳,550025)
3(贵州大学化学工程学院,贵州贵阳,550003)4(贵阳市生产力促进中心,贵州贵阳,550002)
摘 要 研究了制备磷酸化香菇多糖的工艺条件。通过单因素实验,考察磷酸化试剂、温度、时间、pH值对修饰
后香菇多糖磷酸根接枝量、粘度的影响,确定最佳磷酸化工艺条件为:质量分数分别为5%三聚磷酸钠(STPP)和
2%三偏磷酸钠(STMP)混合液作‘为磷酸化试剂,温度90℃,时问59.0,所得磷酸化香菇多糖衍生物的磷
h,pH
酸根接枝量为6.826%。红外光谱分析结果证实,修饰后的香菇多糖含有磷酸酯基团。粘度测定表明,香菇多
耱经磷酸化修饰后的粘度基本没有变化。
关键词磷酸化,香菇多糖,工艺优化
微生物多糖主要由细菌、酵母菌、霉菌产生,故
1 材料与方法
可分为细菌多糖和真菌多糖[1]。真菌多糖作为药物
1.1实验材料
研究始于1950年代,在1960年代以后成为免疫促进
香菇多糖(纯度40%),由上海康舟真菌多糖有
剂而引起人们兴趣[2]。香菇多糖(Lentinan,LNT)
限公司提供。
就是研究得较透彻的多糖之一,香菇(Lentinus
edodes(Berk.)Sing.)是侧耳科(Pleurotaceae)的
担子菌,世界名贵食用兼药用菌之一,其化学结构属
于吡喃葡聚糖。现代研究证明,香菇多糖具有抗病
毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功 NaOH,Vc,H。SO。,钼酸铵,均为市售分析纯试剂。
能‘引。 1.2实验仪器
已完成的研究证实,多糖的活性直接或间接地受 TDL一40B台式离心机,上海安亭科学仪器厂;
其分子结构的影响,采取一定的方法对多糖分子结构
进行修饰,可以提高或赋予多糖活性、降低其毒副作 型超声波清洗机,北京创新德超声波研究所;pHS-25
用H]。目前对多糖进行修饰的常见方法有硫酸化、磷 型酸度计,上海伟业仪器厂;81—2型恒温磁力搅拌
酸化、乙酰化、烷基化、磺酰化、羧甲基化等[4’5],其中 器,上海司乐仪器有限公司;NDJ一1型旋转式粘度计,
硫酸化修饰香菇多糖是研究得较为成熟的一种方 上海天平仪器厂;DZF一0型真空干燥箱,上海跃进医
法[6]。香菇多糖经硫酸化修饰后,其抗肿瘤、抗凝血 疗器械厂;SHZ一ⅢD型循环水真空泵,上海亚荣生化
和免疫调节作用得到很大提高[7],而且具有了较明显 仪器厂;DDS-11A电导率仪,上海虹益仪器仪表有限
公司;UV一2550紫外分光光度计,日本岛津公司;
的抗艾滋病毒的效果Is],可抑制HIV-1产生的病
变[8]。多糖的磷酸化分子修饰是一种共价修饰,是支
YOKYO
链上的羟基被磷酸根取代的过程印]。目前关于香菇
燥机,德国博励行仪器有限公司。
多糖磷酸化修饰方面的报道很少,文中采用混合磷酸
1.3实验方法
盐试剂对香菇多糖进行磷酸化修饰,并对其工艺条件
1.3。1反应样液的制备
进行了初步的研究,旨在获得磷酸化香菇多糖的最大
称取j定量的香菇多糖
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