微生物遗传变异以及育种.pptVIP

②置换的机制 ：直接引起置换的诱变剂：可直接与核酸反应，不论在机体内还是在离体条件下均有作用。如：亚硝酸、羟胺等。间接引起置换的诱变剂：此类诱变剂均为碱基类似物，如：5-BU，2-AP、5-AU等。 （2）移码突变（frame-shift mutation 或phase-shift mutation） 移码突变：指诱变剂使DNA分子中的一个或少数几个核苷酸的添加或缺失，从而是该部位后面的全部遗传密码发生转录和转义错误的异类突变。点突变 移码突变诱变剂有：吖啶类染料（吖啶橙吖啶黄、原黄素等）和一系列ICR类的化合物。 ICR：由美国的癌症研究所（Institute for Cancer Research）合成，是一些由烷化剂与吖啶类化合物相结合的化合物。 （3）染色体畸变（chromosomal aberration） 某些理化因子，如X射线等的辐射及烷化剂、亚硝酸等，除了能引起点突变外，还会引起DNA的 大损伤(macrolesion)——染色体畸变，它既包括染色体结构上的缺失(deletion)、重复(dup lication)、插入(insertion)、易位(translocation)和倒位(inversion)，也包括染色体数 目的变化。 ①种类：染色体内畸变；染色体间畸变 ②转座因子 ：插入序列（IS，insertion sequence）：只能引起转座效应而不含其它任何基因；转座子（Tn，transposon）除了与转座有关的基因外，常含有抗药性基因或乳糖发酵基因等其他基因； Mu噬菌体（mutator phage即诱变噬菌体）是E.coil的一种温和噬菌体，无特定整合位点。 ２、自发突变的机制 （1）自发突变：没有人工参与下的生物体自然发生的突变。 （2）可能的机制： 1）背景辐射和环境因素的诱变； 2）微生物本身有害代谢物的诱变效应； 3）DNA复制过程中碱基配对错误引起。 （六）紫外线DNA的损伤及其修复 1、损伤机制：主要作用是使同链DNA的相邻嘧啶间形成共价结合的嘧啶二聚体。二聚体的出现会减弱双链氢键的作用，并引起双链结构扭曲变形，阻碍碱基间的正常配对，从而有可能引起突变或死亡。 2、修复机制： ⑴光复活作用（photoreactivation）：经紫外线照射过的微生物立即暴露于可见光下时， 可明显降低其死亡率的现象。光解酶的作用。 对照：8×106个/ml E.coil 紫外线 100个/ml E.coil 试验：8×106个/ml E.Coil紫外线 360～490nm可见光30分钟 2×106个/ml E.coil ⑵暗修复（dark repair），又称切除修复（excision repair）：这种修复与光无关，必须有四种酶的参与：ａ．核酸内切酶　ｂ．核酸外切酶　ｃ．DNA聚合酶　ｄ．连接酶。 二、突变与育种 （一）自发突变与育种 1、从生产中选育：在日常生产过程中，微生物也会以一定频率发生自发突变。富于实际经验和善于细致观察的人们就可及时抓住这类良机来选育优良的生产菌株。例如，从污染噬菌体的发酵液中有可能分离到抗噬菌体的新菌株。 2、定向培育优良品种：定向培育是指用某一特定因素长期处理某微生物的群体，同时不断的对它们进行移种传代，以达到积累并选择相应的自发突变株的目的。由于自发突变 的 频率较低，变异程度较轻微，所以培育新种的过程十分缓慢。与诱变育种、杂交育种和基因 工程技术相比，定向培育法带有“守株待兔”的性质，除某些抗性突变外，一般要相当长的时间。 （二）诱变育种 1、诱变育种：是指利用物理或化学诱变诱变剂处理均匀分散的微生物细胞群，促进其突变率显著提高，然后采用简便、快速、和高效的筛选方法，从中挑选出少数符合育种目的的突变株，以供生产或科研之用。 2、诱变育种的基本环节（以产量突变为例） 3、诱变育种的几个工作原则 ⑴选择简便有效的诱变剂：诱变剂主要有两大类，即物理诱变剂和化学诱变剂。物理诱变剂如紫外线、X射线、γ射线和快中子等；化学诱变剂种类极多，主要有烷化剂、碱基类似物和吖啶类化合物。一切 生物的遗传物质都是核酸，尤其是DNA，一切诱变剂的作用机制都是引起DNA分子结构的改变。因此，凡对微生物有效的诱变剂，对高等生物同样有效，反之亦然。艾姆斯试验（Ames test）：是70年代中期所发明的利用微生物营养缺陷型的回变来检出化学致癌剂的一种方法。其基本原理是：鼠伤寒沙门氏菌的组氨酸缺陷型（his-）菌株在基本培养基[-]的平板上不能生长，如发生回复突变则能生长。 ⑵挑选优良的出发菌株 ： ①最好是经过生产中选育过的自发变异菌株； ②采用具有有利性状的菌株； ③选择已经发生其它变异的菌株作为出发菌株；④在细菌中曾