苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒新增效蛋白的研究.pdfVIP

苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒新增效蛋向的研究 1引言 1．1核型多角体病毒的概述 按型多角体病毒(nuclear virus，NPV)是研究得最早和晟为洋细的一类昆虫病 polyhedrosis 毒。早庄12世纪前，我国就有家蚕NPV病(即脓病)的记载和详细描述。西方所称的家蚕黄痖 caliJbrnica)核多角体病毒多粒包埋品系(简称AcMNPV)。 纹夜蛾(Autographa 1．1．1 包涵体的形态结构 NPV的包涵体(inclusion 核中产生的包涵和保护病毒粒子的一团蛋向质结品，一般早多面体形，具棱角，网而得名。多角 体人小直径约在0．5～15pm之间，人多为2～3pm，且常田寄主昆虫种类的不同而不同，即使同 种昆虫，甚至在同一寄主细胞内，多角体的形状人小也有区别。常见的形状有三角形、四角形、 五角形、六角形、立方形、近圆形平¨不规则形。 同一品系或分离株病毒的多角体，它的形状基本上是趋丁：稳定的，相同寄主而不同品系或分 similis)幼 离株的多角体，它们的形状平Il平均大小就可能相差较大。曾从罹病盗毒蛾(Euproctis 虫中分离剑两株NPV，其中一个分离株的多角体是多形状的，而另一分离株的多角体则只有立方 形，用这两个分离株的NPV混合感染盗毒蛾幼虫时，没有发现在同一个被感染细胞中同时含有 这两个分离株的病毒【ll，因而在一定意义上，多角体的形状可以作为辨别一个病毒品系或分离株 的标志。 多角体的表面具膜，在超薄切片上可以看到多角体的周边有一层电子致密层、多角体经弱碱 溶解后也会留下一个囊状空膜12J，但时间延长也可以被碱液溶解掉。多角体蛋白质分子是按立方 体系排列的，在分子行间很容易看到90。角[31．蛋白质分子的亚基也按立方体系排列14】，在分子 与分子之间，亚基与亚基之间有等距离的空隙14。】。 1．1．2病毒粒子的形态结构 病毒粒子(virion)杆状，所以又称病毒杆状体(virusrod)。病毒粒子外被两层膜一囊膜 (envelope)和衣壳(capsid)。囊膜又常称为外膜(outer membrane)，这是一层脂质膜，有典型的单位膜(unit 河』E农业人学顶十学fi》=(毕业)论文 在NPV中，每个囊膜可以包封一个至多个核农壳，一个囊膜内有多个摊列成束的核农壳的，常 (Virus 称为“病毒束” bundle)。．}{|一定浓度的碱液处理病毒，囊膜可变成气球状而消火，农壳 仍然保留。获得囊膜的病毒粒子被随机地包埋在蛋白质构成的结晶状多角体之内，一个多角体可 以包]；ll!一个至多个病毒粒子。许多未被包坤的病毒粒子则只有核农壳。 度在一种寄主皑虫中变异不人，但其豇释却依囊膜山轩状核农壳的数量不同而变异很人，人小范 J。 粒子人小亦有差异【7 复合体，核蛋向沿一条中心轴(粗约l～10nm)，称螺旋卷曲状，但并不连续。病毒粒子的囊膜 45nm。农壳由蚩F1质的结构单位构成。病毒粒|『横切面可见23～25个结构单位，共计每个病毒 粒子核农壳有1200～1300个结构单位。此外，农壳的一端存在数层结构突起，另一端则具有厚 约13rim的底版。 1．1．3核型多角体病的外部病状 或停止取食，体色渐起变化，如变黄，发白等，并伴有虫体肿胀特征：幼虫死后皮肤常常变得饭 脆弱，轻触即破，流出浓状体液，但无难闻臭味。许多患有这种病的食叶性鳞翅目幼虫，常常爬 剑树枝顶端，州腹足附着植物枝叶，倒悬而死。昆虫感染NPV后．一般经过4天以上才开始死 亡。 1．2病毒增效蛋白简介 病毒增效蛋白来源于昆虫病毒，是由病毒基因编码的一种磷脂蛋白，分子量大小在89～110kD 之间，曾被称之为病毒促进因子、病毒增强因子(viral enhancing 或病毒增强素(synergistic 某些杆状病毒基因编码的具有促进核型多角体病毒感染的一类金属蛋白酶，这种蛋白酶能增强 NPV对体外培养细胞的感染力，还能提高苏云金杆菌(Bacillus 虫剂的杀虫效果