课件：chaerandec.pptVIP

根据物质的吸附性差别进行分离 物理吸附 依靠被分离物质与吸附剂间的相互作用力 无选择性，吸附与解吸过程可逆 硅胶（100目，30－60倍量）、氧化铝、活性炭柱色谱 化学吸附 具有选择性，吸附十分牢固，有时甚至不可逆 碱性氧化铝吸附黄酮、酚酸 酸性硅胶吸附生物碱 半化学吸附 依靠氢键吸附，力量较弱，介于物理吸附和化学吸附之间 聚酰胺吸附黄酮、醌、酚类;氢键数目越多，吸附力越强 溶剂洗脱力：水甲醇丙酮NaOH 溶液甲酰胺二甲基甲酰胺 大孔吸附树脂是由于范德华力或氢键的结果，是吸附性和分子筛原理相结合的分离材料 硅胶、氧化铝柱色谱过程 吸附剂用量一般为样品的30-60倍，分离极性小的样品可提高至100-200倍量 通常100目为宜，加压柱色谱可采用更细粒度 尽可能选用极性小的溶剂装柱和溶解样品，利于样品在柱上形成狭窄的原始谱带 洗脱溶剂的极性应逐步增加，跳跃不能太大，调节混合溶剂的极性，达到梯度洗脱分离物质的目的 为避免发生化学吸附，酸性被分离物质宜用硅胶，碱性被分离物质宜用氧化铝进行分离 TLC的Rf值0.2-0.3可以确定柱色谱的最佳分离条件 大孔吸附树脂 为苯乙烯，二乙烯苯或а-甲基丙烯酸酯型。 其中苯乙烯、二乙烯苯型为非极性树脂， 2-甲基丙烯酸酯型为中极性树脂。 大孔吸附树脂的结构中包含了许多微观小球组成的网状孔穴结构。 一般来说，大孔树脂的色谱行为具有反相的性质。被分离物质的极性大先流出色谱柱。 大孔吸附树脂本身的多孔性，在一定条件下，化合物体积越大，吸附力越强。 对非极性大孔树脂，洗脱剂极性越小，洗脱能力越强，对中极性大孔树脂及极性较大化合物，则极性较大溶剂洗脱力强 一般上样后先用水（或酸、碱水）洗去杂质，然后用不同浓度的含水醇、甲醇、乙醇、丙酮等依次洗脱 根据物质分子大小差别进行分离 凝胶滤过色谱,排阻色谱 载体为葡聚糖凝胶，在水不溶，但可膨胀成具有三维空间网状结构的球形颗粒 大分子不能渗入凝胶颗粒内部，随溶剂在颗粒间隙移行，先流出柱 按分子由大到小的顺序先后出柱，可用于分离分子量1000以下的化合物 凝胶种类 Sephadex G-25：网孔越稀疏，吸水后膨胀越大 Sephadex LH-20：Sephadex G-25羟丙基化，不仅可在水中应用，也可在极性有机溶剂或他们与水的混合溶剂中膨胀使用 膜分离技术 微滤100nm; 超滤10－100nm; 纳滤1－10nm; 反渗透 1nm 解离程度不同进行分离：离子交换色谱 离子交换反应的原理是树脂与被交换成分间同种电荷离子的等当量替代作用。以离子交换树脂为固定相，水或酸水、碱水为流动相，在流动相中的离子性物质与树脂进行交换而被吸附，再用适合溶剂将被交换成分从树脂上洗脱下来即可。 中药中的碱性成分可用阳离子交换树脂交换, 酚\酸性成分可用阴离子交换树脂交换,然后将交换后的树脂通过调整酸碱环境使吸附物游离,选择适当溶剂将吸附物溶解出即可。 由于被交换的混合物成分的酸性或碱性不同而解离度不同，与同一离子交换树脂的交换能力不同而被分离。 pandect Introduction Biosynthesis Method of extraction and isolation Structure research 化合物结构研究步骤 确定化合物的纯度 TLC或PC展开，可见、UV或显色观察 三种展开系统中均呈单一斑点 正、反相色谱均呈单一斑点 确定分子式并计算不饱和度 元素分析配合分子量的测定 HR-MS:精确到小数点后3位 确定化合物结构 MS IR UV NMR OCD MS EI-MS(electron impact ionization):电子轰击法 需加热气化电离，容易发生热分解或难于气化的化合物难以测定分子离子峰或难以测定 FD-MS(field desorption ionization):场解析电离 10kv高压电使试样电离，适合热不稳定、极性大、难挥发的化合物 显示明显的[M＋H]+、[M＋Na]+ 、[M＋K]+ FAB-MS(fast atom bombardment):快原子轰击电离 高速中性粒子碰撞试样使之电离 除给出分子量及糖的碎片信息外，在低质量区还给出苷元的结构碎片 IR and UV-vis IR: infrared spectra 特征区：4000-1500cm-1，羟基、氨基以及重键、芳环等吸收均出现在此区域 指纹区： 1500-600cm-1 UV－Vis：ultraviolet－visible spectra 吸收紫外光及可见光所引起π－ π，n－ π跃迁 UV光谱是分子中含有共轭双键、α，β－不饱和羰基以及芳香化合物的结构鉴定的重要手段 UV：200-400n; Vis：400-760nm NMR 1H－NMR：分子中氢的