课件：三细胞生物学研究方法.ppt

? 细胞的培养 ? 细胞工程 第三节 细胞培养、细胞工程与显微操作技术 一、细胞的培养 ? 动物细胞培养 ? 类型： 原代培养细胞（primary culture cell） 继代培养细胞（sub-culture cell） ? 细胞株（cell strain）: 正常二倍体，接触抑制 ? 细胞系（cell line）： 亚二倍体，接触抑制丧失 首先从健康动物取出组织块，剪碎，用浓度与活性适中的胰酶或胶原酶与EDTA（螯合剂）等将细胞连接处消化分散，给予良好的营养液与无菌的培养环境（接近体温与体内pH）, 在培养瓶中进行静止或慢速转动培养。不论用何种培养液，一般都要加一定量的小牛血清，这样才有利于细胞的贴壁生长与分裂。 动物原代细胞培养步骤 原代细胞（primary cell） 传代细胞（sub-culture cell） 将肌体取出的细胞或组织进行实效培养。实效培养的细胞大约增殖10代左右，这样的细胞称为原代细胞。 原代培养的细胞继续转接培养称为传代培养。用于传代培养的称为传代细胞。 原代细胞一般传至10代左右就不易传下去了，细胞生长出现停滞，大部分细胞衰老死亡，但有极少数细胞可能渡过“危机”而传下去。这些存活的细胞一般又可顺利地传