基因工程原理-第章外源目的基因表达与调控.pptVIP

第一节 外源基因表达机制 （1）氨基酸活化和肽链的起始： AA+tRNA+ATP——AA-tRNA+AMP+PPi （2）肽链的起始： 原核生物：30S+mRNA——+AA-tRNA——+50S 真核生物：40S+ AA-tRNA——+ mRNA——+60S （3）肽链的延伸：肽基转移酶 （4）肽链的终止：终止密码子(UAA、UAG、UGA)和终止因子 （5）折叠和加工 DNA分子上能与RNA聚合酶结合并形成转录起始复合体的区域，在许多情况下，还包括促进这一过程的调节蛋白的结合位点。 转录起始点：通常是一个嘌呤(A或G) Pribnow框，又叫-10区：TATAAT Sextama框，又叫-35区：TTGACA 间隔区 rRNA基因启动子（Ⅰ型）：rRNA mRNA基因启动子（Ⅱ型）：mRNA、部分核内小分子RNA（snRNA） tRNA基因启动子（Ⅲ型）：5SrRNA、tRNA、snRNA 增强基因启动子工作效率的顺式作用序列，能够在相对于启动子的任何方向和任何位置(上游或下游)上都发挥作用。 特性： 一、大肠杆菌基因表达系统 （三）常见的大肠杆菌表达系统 1. Lac表达系统 （四） 外源基因在大肠杆菌中的表达形式 包涵体——在一定条件下，外源基因的表达产物在大肠杆菌中积累并致密地聚集在一起形成无膜的裸露结构。 融合蛋白——将外源蛋白基因与受体菌自身蛋白基因重组在一起，但