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山羊SPRN基因真核表达载体构建 摘要：以山羊小脑cDNA为模板，利用RT-PCR法 扩增获得了 SPRN基因完整编码区片段，将其连接到pMD19-T 载体上，转化感受态JM109后，筛选并鉴定阳性克隆，通过 序列测量，将序列正确的片段双酶切后连接到真核表达载体 pEGFP-N 1上。结果表明，成功构建了山羊SPRN基因完整编 码区的真核表达载体。 关键词：山羊；SPRN基因；RT-PCR；真核表达载体 中图分类号:S827文献标识码：A文章编号:0439-8114 （2013） 22-5618-03 SPRN基因编码Shadoo （简称Sho）蛋白，在结构上与 PrPc类似。Sho蛋白约包括130?150个氨基酸，N端保守， 含有最多6个富含Arg的四肽XXRG （X是G、A或S）重复的 碱性区域和约20个AA与PrPc有非常高同源性的疏水区。 与N端相比，C端不够保守，与PrP差异较大，包含一个糖 基化位点，末端是GPI锚的信号肽。Sho蛋白氨基酸在不同 物种中差异不大［1］。 Sho蛋白具有与PrPc相似的神经保护作用，因此认为 SPRN基因是一个与TSEs有关的一个候选基因［2］。2007年8 月发现了称为Shadoo的阮病毒蛋白，证明了这种理论上 的病毒蛋白真正存在，同时也观测到了这种病毒在反病毒传 染病过程中的意外改变，中枢神经系统中Shadoo蛋白具有 类似于PrP