天智颗粒对脑线粒体损伤大鼠纹状体细胞外液乙酰胆碱和生物胺的影响.pdfVIP

5ml，用 ml，1％Kathon 定化酶反应器。流动相：每升含85％磷酸3．4 m1．min～。LC-4C电化学检测器， NaOH调pH至8，5。确定流速为1．0 mv，滤波O．1 白金(Pt)电极和Ag／AgCl参考电极，工作电压设为+500 Hz， 确定增益为O．2肛A。 DA等生物胺类递质的水平可分别反映脑内胆碱能、肾上腺素能和多巴 胺能神经系统的功能。本研究对单一监测ACh、Ch水平的微透析实验进 行了改进，使一次收集的透析液能分别用于ACh、Ch和生物胺类递质的 测定，以便对多个神经系统的功能进行同步评价。 3．建立脑内灌流NaN3所致大鼠脑线粒体损伤的急性模型：神经退 行性疾病的发生与线粒体功能异常密切相关。NaN3(线粒体呼吸链复合 体IV抑制剂)作为工具药，已广泛地应用于神经退行性疾病的研究，它 通过影响线粒体曲功能而造成神经细胞的损伤。以往的造模方式以长期 皮下注射和细胞培养为主。本研究应用微透析技术脑内灌流O．2％的 NaN3，造成大鼠局部脑区线粒体急性损伤，在遣模的同时收集透析液， 动态监测NaN3灌流前、灌流时和灌流后脑细胞外液中ACh、Ch和生物 胺类递质水平的变化情况。本研究应用了-9以往不同的造模方法，对线 粒体损伤的动物模型进行了多个神经系统递质水平的同步、动态监测， 为在整体动物上研究脑复杂功能过程中的化学调控提供了可能。 4．天智褒粒神经保护机理的研究： 动物分组和药物处理：SD大鼠随机分为5组：对照组、模型组、 TZ组、都可喜组和TZ+都可喜组，每组5只。正常组和模型组动物灌胃 2 3．6 等量常水，其余各给药组每天分别灌胃Tzg·kg。(生药量l g．kg“)． 都可喜10 mg‘kg“(甲磺酸阿米三嗪7．5mg-kg“和萝巴新2。5 mg·kg“)、 2 以及Tzg‘kg“和都可喜10 mg’kg～，连续14天。 手术和微透析：灌胃第l 2％戊巴比妥钠麻醉 3天进行手术：大鼠ip (40 mg·kg。)，埋植探针套管于纹状体内(定位坐标A：+O．2mm，L： +3mm，V：7．5mm)。手术后24小时进行透析，插探针于套管内。对照组 大鼠用新斯的明林格液(含10 btmol·L。新斯的明的林格溶液，N—Rin2er) 灌流450 min；其它各组大鼠用N—Ringer灌流120min后，改用含O．2％ NaN 3的N—Ringer液(含29‘L～NaN3和10 p．mol-Lo新斯的明的林格 50 溶液，NaN3一N—Ringer)灌流l 80min。 min，再恢复N．Ringer灌流1 灌流速度为2IxL’rain～，平衡60 rain后开始收集样本，每30min收集 一管。取出30肛L透析液测定ACh、Ch，其余30肛L透析液于．20℃保 存，用于生物胺类递质的测定。 微透析过程示意图 对照组 模型组、 笙罱竺 ————